Phloridzin-sensitiv transport av Echinacosid og Acteosid og endret tarmabsorpsjonsvei etter påføring av Cistanche Tubulosa-ekstrakt

For mer informasjon:ali.ma@wecistanche.com

Tadatoshi Tanino et al

Abstrakte mål

Målet med denne studien var å adressere de gunstige effektene avCistanche tubulosa ekstraktpå å forbedre den lave tarmpermeabiliteten til echinacoside (ECH) og acteosid (ACT).

Metoder

Absorpsjon av ECH og ACT iCistanche tubulosa ekstraktble karakterisert ved å bruke humane intestinale Caco-2-cellemonolag med intakte forbindelser. Glukosetransportøravhengig absorpsjon av ECH og ACT ble bekreftet ved en in-situintestinal perfusjonsteknikk.

Hovedfunnene

Den tilsynelatende permeabiliteten (Papp) var ikke signifikant forskjellig mellom intakt ECH og intakt ACT. I nærvær av phloridzin ble Papp av ECH og ACT ved en høy dose redusert til 20 prosent av den respektive ikke-behandlingen, men ble ikke endret av phloretin og verapamil.Cistanche tubulosa ekstraktved lave og høye doser forbedret Papp av ECH og ACT (begge tre ganger), noe som resulterte i deres store deltakelse i natriumavhengig glukosetransportøruavhengig absorpsjon. Ved lav konsentrasjon ble samtidig ECH- og ACT-nivåer i portalblod signifikant undertrykt av floridzin.

Konklusjon

Kostholdet og det medisinskeCistanche tubulosa ekstraktForbedring av intestinal absorpsjon av ECH og ACT kan tjene til bedre å håndtere menneskers helse, selv om involveringen av floridzin-sensitiv transport bør reduseres.

Nøkkelordakteosid; Caco-2 celle monolag;Cistanchetubulosa ekstrakt; echinacoside;floridzinfølsom glukosetransportør

Cistanche tubulosa ekstrakt

Klikk til Cistanche tubulosa pulver

Introduksjon

Røttene til Cistanche tubulosa har tradisjonelt blitt brukt til medisin og mat.Cistanche tubulosa ekstrakter kjent for å ha farmakologiske effekter i ulike hjernesykdommer, antialdringsfunksjoner, fettmetabolisme og hårvekst.[1–4] Nylig har iridoider, monoterpenoider, fenyletanoidglykosider og lignaner blitt isolert fraCistanche tubulosa.[5,6] Fenyletanoidglykosider, en klasse av polyfenoliske forbindelser, er de viktigste kjemiske ingrediensene i Cistanche-arter, [7] selv om mengden deres varierer mellom forskjellige arter. Echinacoside (ECH; figur 1) er en av de viktigste fenyletanoidglykosidene i HerbaCistanchis. Det hydrolyseres til acteosid (ACT; også kalt verbascoside) av enzymer av bakteriell opprinnelse i tykktarmen.[8,9] ECH og ACT har den gunstige aktiviteten av hepatobeskyttelse[10] og anti-inflammasjon[11] hos gnagere. Overraskende nok forbedrer svært vannløselig ECH atferdsmessige og nevrokjemiske utfall i en musemodell av Parkinsons sykdom og hemmet kaspase-3 andcaspase-8-aktivering i cerebellare granulaneuroner.[9] Det er velkjent at blod-hjerne-barrieren strengt begrenser inngangen og distribusjonen av fremmedlegemer inn i hjernen fra blodet. Wu et al. [12] viste også at vannløselig ACT ble raskt distribuert i hjernevev hos rotter. Derfor kan ECH og ACT transporteres inn i hjernen, tarmene og leveren av det eller de spesifikke systemene.

Selv om det er sterke bevis som tyder på at forbruk avCistanche tubulosa ekstrakter gunstig for menneskers helse, permeabiliteten til ren ECH over Caco{{0}} cellemonolag ved en apikale konsentrasjon på 8,4 ± 1,6 ug/ml er lik eller under den til paracellulær transportmarkørmannitol.[13] Når ren ECH administreres oralt til rotter (dose, 1{{10}}0 mg/kg), er absorpsjonen ekstremt rask (Tmax,15 min), og den maksimale serumkonsentrasjonen er svært lav (Cmax, 0.61 ± 0.32 ug/ml).[14] Den absolutte biotilgjengeligheten til ECH er bare 0,83 prosent . Tilsvarende, når Caco-2-celler inkuberes med en fenolfraksjon delvis renset fra avløpsvann fra olivenmøller, er rent ACT-opptak raskt med toppakkumulering etter 30 minutter og en total akkumuleringseffektivitet på 0,1 prosent, noe som gir intracellulære nivåer på 130 pmol/mg celleprotein. [15] Hos rotter ble den maksimale konsentrasjonen (0,13 ± 0,03 ug/ml) av ren ACT nådd innen 30 minutter etter oral dosering med 100 mg/kg, [12], noe som antyder hurtig intestinal absorpsjon. Den orale biotilgjengeligheten av ACT, så vel som ECH, er ganske lav (0,12 ± 0,04 prosent), noe som tyder på muligheten for førstegangseffekter i tarmkanalen og leveren. I rottegalle er metylerings- og glukuronideringskonjugater av ECH hovedmetabolitter, [16] selv om omfanget av levermetabolismen fortsatt er uklart. Vi fant foreløpig ut at ECH og ACT var ganske stabile i homogenatene av tarmslimhinnen hos rotter og kunstig magesyre (data ikke vist). Najar et al. [17] demonstrerte at ACT hemmer P-glykoprotein (P-gp)-ATPase-aktivitet på en måte som ligner på verapamil (en representativ P-gp-hemmer), noe som innebærer en P-gp-modulator; det er imidlertid usikkert om ACT er tilgjengelig som et P-gp-substrat. Interessant nok viste de nylige funnene av kostholdsflavonoid-D-glukosider at multilegemiddelresistensprotein (MRP2) maskerte den natriumavhengige glukosetransportøren (SGLT)1-mediert opptak av quercetin 4'-O- -glukose,[18 ,19] som er ansvarlig for svært dårlig absorpsjon. Imidlertid er svært lite kjent om følsomheten til polyfenoliske glukosider for absorberende transportører, inkludert glukosetransportører. Informasjon om absorpsjonsegenskapene til quercetin4'-glukosid og raskt blod-hjerne-barriere-permeable ECH fikk oss til å undersøke det transportørsensitive opptaket av dietoid-glykosylet. tubulosa.

I denne studien undersøkte vi glukosetransportør-mediert absorpsjon av intakt ECH og ACT ved bruk av humantarm Caco-2 celle monolag. Samtidig absorpsjonstransport av ECH og ACT samtidig kosttilskuddCistanche tubulosa ekstraktble karakterisert av en in-vitromodell og in-situ intestinalt perfusjonssystem med portalblodprøvetaking, som lett kan skille mellom absorpsjonsgrad og unngåelse av hepatisk first-pass-disposisjon.

Materialer og metoder

Materialer

Intact ECH og ACT var sjenerøse gaver fra EishinTrading Co., Ltd (Osaka, Japan). Phloridzin og phloretin ble kjøpt fra Tokyo Kasei Co., Ltd. (Tokyo, Japan). Verapamil og p-kumarsyre, brukt som interne standarder for høyytelses væskekromatografi (HPLC)-analyse, ble hentet fra Sigma-Aldrich (St Louis, MO , USA). Alle andre kjemikalier som ble brukt var av analytisk kvalitet og kommersielt tilgjengelig.

Plantemateriale og tilberedning av etanolisk ekstrakt

C. tubulosa (SCHRENK) R. WIGHT (Orobanchaceae) er en flerårig parasittplante som vokser på røttene til Salvadoraor Calotropis-arter, og er distribuert i nordafrikanske, arabiske og asiatiske land. Tørkede stilker av C. tubulosa ble pulverisert og ekstrahert tre ganger med metanol under tilbakeløp i 3 timer. Fordampning av løsningsmidlet under redusert trykk ga metanolekstraktet. Themetanolic ekstrakt (kommersiell klasse, batch nr. 20070130; register handelsnavn, Sabaku Ninnjinn Kanka) var en sjenerøs gave fra Eishin Trading Co., Ltd via Muraoka og Morikawa (Kinki University, Japan), og botanisk identifikasjon ble utført av professor Jia Xiaoguang i Xinjiang-instituttet for tradisjonell kinesisk og etnologisk medisin.

Planteekstraktanalyse: kromatografi

Vi bestemte ECH- og ACT-innhold iCistanche tubulosa ekstrakt(Batch nr. 20070130) ved en HPLC-analyse beskrevet nedenfor. Dataene som er oppnådd er vist i tabell 1.

Cellekultur

Caco{{0}}-celler, kjøpt fra American Type CultureCollection (ATCC, Rockville, MD, USA), ble brukt ved passasjene 38–53. De ble dyrket i et kulturmedium bestående av Dulbeccos modifiserte Eagles medium (DMEM, Nacalai Tesque Co., Kyoto, Japan) supplert med 0.1 mM ikke-essensielle aminosyrer, 10 prosent varmeinaktivert føtalt bovint serum, 100 U/ml penicillin G og 0,1 mg/ml streptomycinsulfat.

Transportstudier

Caco-2-celler ble belagt med en tetthet på 6,4 × 103 celler/cm2 på polykarbonatfiltre. Monolag ble brukt til transportforsøk 21–25 dager etter såing. Intakt ECH ogACT som tilsvarte innholdet iCistanche tubulosa ekstrakt (4.5 and 13.5 mg/ml) were mixed with DMEM medium containing 0.5% dimethylsulfoxide to maintain the integrity of the cell monolayer over the periods of the experiments. Intact ACT equivalent to ECH content in the extract was also dosed in the incubation medium. The extract was suspended in a DMEM medium and was centrifuged to remove insoluble components. Supernatants were loaded to the apical side. At the indicated times, an aliquot of the incubation medium was withdrawn from the basolateral side and was mixed with acetonitrile containing an internal standard for the assay. In separate experiments, phloridzin (final concentration, 1 mM) and verapamil (final concentration, 0.2 mM) was added to the apical side of the monolayer; however, phloretin (final concentration, 0.3 mM) was treated on both sides of the monolayer. The integrity of monolayers was monitored by transepithelial electrical resistance (TEER) using Millicell-ERS (Millipore, Bedford, MA, USA) before and after transport experiments. TEER values of monolayers used were >300 Ω·cm2.

Echinacoside innCistanche tubulosa ekstrakt

In-situ intestinal perfusjon

Wistar hannrotter (230–250 g) ble hentet fra SLCJapan (Hamamatsu, Japan). Dyrene ble holdt i et luftkondisjonert rom under en 12 timers lys/mørke-syklus i 1 uke før bruk. Rotter ble matet med standard laboratoriefôr (Oriental Yeast Co., Ltd., Tokyo, Japan) med vann ad libitum og ble fastet over natten før testen. Den sirkulerende perfusjonsstudien i stedet ble utført i henhold til den modifiserte prosedyren beskrevet av Mihara et al. [20] Kort fortalt ble rotter bedøvet med 25 prosent uretanløsning (1 mg/kg) for å unngå blodtrykksfall. Et midlineabdominalt snitt ble gjort og tynntarmen ble eksponert. Gallegangen ble ligert for å unngå gallesekresjon inn i perfusatet. Hele tynntarmen som ett segment (fra tolvfingertarmen til ileum) ble skylt med vanlig saltvann ved 37 grader i 10 minutter til vasken ble klar. Glassrør koblet til silikonrør ble deretter kanylert inn i begge ender av tynntarmen og festet med suturtråd. Deretter ble tynntarmen erstattet i magen, og kanylene ble koblet til en peristaltisk pumpe. Portvenen ble kanylert med polyetylenrør (PE10).Cistanche tubulosa ekstraktkommersielt tilgjengelig ble suspendert i Krebs–Henseleit bikarbonatbuffer (pH 7,4) for å gi en sluttkonsentrasjon på 4,5 mg/ml og ble sentrifugert i 10 min ved 8000 rpm for å fjerne uløselige komponenter. Supernatant i fravær eller tilstedeværelse av floridzin (1 mM) ble samlet opp i et reservoar som ble holdt ved en temperatur på 37 ± 0,5 grader gjennom hele forsøket. På de angitte tidspunktene ble blod tatt gjennom portvenekanylen. Etter sentrifugering av blodprøver ble det resulterende plasma deproteinisert med acetonitril inneholdende den interne standarden og ble sentrifugert ved 3000 rpm. Supernatanter ble fordampet, og resten ble oppløst med en mobil fase bestående av acetonitril og 0,5 prosent eddiksyre. Den blandede løsningen ble lastet på en HPLC-kolonne. Rotter ble brukt i samsvar med etiske prosedyrer i henhold til retningslinjer for stell og bruk av forsøksdyr utstedt av den japanske regjeringen og Kinki University.

HPLC-analyse

HPLC-analyse ble utført på et system utstyrt med aShimadzu SPD{{0}}A, UV-detektor, Shimadzu LC-10A-pumpe og Shimadzu C-R4A kromatopac-integrator (Kyoto, Japan). ECH og ACT ble separert ved hjelp av en Inertsil ODS-kolonne (5 μm, 4,6 × 15 0 mm, GL Sciences Inc., Osaka, Japan). En mobil fase av acetonitril og 0,5 prosent eddiksyre i et forhold på 15:85 (v/v) ble brukt ved en strømningshastighet på 1,0 ml/min. Deteksjon ble utført ved 334 nm

Kinetisk analyse

Tilsynelatende permeabilitetskoeffisienter (Papp) ble estimert fra helningen til den lineære delen av tidsforløpet for sammensatt transport over Caco-2 cellemonolag, som følger: P dQ dt AC app=( ) ( )

der dQ/dt er permeabilitetsraten, C0 er den opprinnelige konsentrasjonen av det oppløste stoffet i donorkammeret, og A er overflatearealet til membranen (4,7 cm2).

I in-situ intestinal perfusjonsstudien hos rotter ble arealet under plasmakonsentrasjon-tid-kurven (AUC0–90) i portvenen fra tid null til sist målte beregnet i henhold til den lineære trapesregelen.

Acteosid iCistanche tubulosa ekstrakt

Fysisk-kjemiske egenskaper

Det polare overflatearealet og ikke-polare overflatearealet til forbindelser ble beregnet ved å bruke programmet SAS (versjon 0.8,Olsson, T.; Sherbukhin, V., Synthesis and Structure Administration, 1997–2001, AstraZeneca, Cary , NC, USA). Eksperimentelt bestemte log P- og pKa-verdier ble oppnådd fra litteraturen.

Statistisk analyse

Data ble analysert ved enveis variansanalyse etterfulgt av Tukeys post-hoc test. Sannsynlighetsverdier mindre enn 5 prosent ble ansett som signifikante.

Resultater

Absorptiv transport av echinakosid og akteosid gjennom Caco-2 cellemonolag

Hos mus og rotter administreres intakt ECH[10,14] og ACT[12,21] oralt i doser på 100–1000 mg/kg. DeCistanche tubulosa ekstraktbrukt inneholdt omtrent 30 prosent ECH og 15 prosent ACT per dose. Siden ekstraktet endret osmotisk trykk og pH i inkubasjonsmediet, ble konsentrasjoner på 4,5 og 13,5 mg/ml bestemt basert på oral dosering (intakte forbindelser: 2–20 mg/2{{2{{31} }}} g kroppsvekt) hos mus. Ekstraktet ved lave (4,5 mg/ml) og høye doser (13,5 mg/ml) inneholdt 2.0 og 6.1 mg for ECH og 1.0 og 3.0 mg for ACT, henholdsvis. Vi brukte C. tubulosa-ekstraktmengder som var mye lavere enn den orale dosen av ECH og ACT som er rapportert hos mennesker (anbefalt kosttilskudd av ekstrakt: 150 mg som inneholder ca. 45 mg for ECH og 22,5 mg for ACT). Ved lave og høye doser av intakte forbindelser var absorpsjonsprofiler (figur 2) og Papp ikke signifikant forskjellig mellom ECH og ACT som en ECH-ekvivalent (tabell 2). Når C. tubulosa-ekstrakt i en høy dose på 13,5 mg/ml ble lastet inn i mediet, ble Pappvalues ​​(henholdsvis 1,27 ± 0.13 og 0.34 ± 0,03 × 10-6 cm/s) av ECH- og ACT-konkomitanter var tre ganger høyere enn de (henholdsvis 0,38 ± 0,09 og 0,10 ± 0,03 × 10−6 cm/s) av intakt ECH og ACT (tabell 2). Ekstraktet, i motsetning til intakte forbindelser, forbedret absorpsjonstransporten av ECH og ACT betydelig.

Hemmende effekt av phloridzin, phloretin og verapamil

To characterize the intestinal absorption of ECH and ACT, Caco-2 cell monolayers were incubated with representative inhibitors. Apical glucose transporter 1-sensitive phloridzin dramatically reduced the Papp of intact ECH and ACT to 20% of non-treatment at the high dose (Table 2). Basolateral glucose transporter (GLUT) 2-sensitive phloretin did not decrease the transport of intact ECH and ACT (Figure 3). In this study, higher concentrations (>0.3 mM) floretin kunne ikke brukes på grunn av merkbar celletoksisitet. I tillegg har P-gp blitt identifisert som en viktig aktør som er ansvarlig for interaksjonen mellom urtemedisiner og klinisk viktige P-gp-substrater. Verapamil forbedret ikke den absorberende transporten av intakte forbindelser (figur 3).

Den absorberende transporten av ECH og ACT i ekstraktet (lav dose) ble signifikant hemmet av floridzin (tabell 2 og figur 4). Ekstraktet ved den høye dosen undertrykte floridzin-sensitiv hemming, selv om transporten av intakt ECH og ACT var mer følsom for floridzin (tabell 2).

In-situ intestinal perfusjonsstudie

I en in-situ-studie testet vi om ECH og ACT iCistanche tubulosa ekstraktble transportert av SGLT1 lokalisert på den apikale siden av tynntarmen. Når kostholdsekstraktet i den lave dosen (4,5 mg/ml) ble perfusert, dukket ECH og ACT raskt opp i portalblodet (Figur 5). AUC ble bestemt til 2702,8 ± 384,1 μm·min for ECH og 698,3 ± 197,2 μm·min for ACT. Etter at AUC ble normalisert med innhold fraCistanche tubulosa ekstrakt, var det absorberte beløpet ikke signifikant forskjellig mellom ECH og ACT. SGLT1-sensitivt floridzin, i motsetning til phloretin, undertrykte signifikant den absorberende transporten av samtidig ECH (AUC, 649,4 ± 248,2 μm·min) og ACT (ikke oppdaget).

Diskusjon

Noen urteingredienser er substrater av P-gp sterkt uttrykt i leveren, tarmen, hjernen og nyrene. P-gp er en avgjørende faktor for in vivo biotilgjengelighet, disposisjon og distribusjon av urtemidler, inkludert johannesurt, curcumin, echinacea, ginseng, ginkgo og ingefær.[22,23]Biotilgjengeligheten av genistein{{5} }glukosid, et flavonoidderivat, ble også begrenset av den intestinale MRP2-transportøren. [24] Derfor ble denne studien designet for å undersøke absorpsjonsegenskapene til ECH og ACT samtidig kosttilskudd og medisinskCistanche tubulosa ekstrakt.

Polariserte Caco{{0}}-cellemonolag, så vel som tarmen,[25], uttrykker viktige intestinale legemiddelutstrømningstransportører, som P-gp, MRP og brystkreftresistensprotein.[26]Flavonoider i kosten. av quercetin[27] og myricetin[28] har vist seg å hemme P-gp-mediert utstrømning både i cellinene og dyremodellene. Verapamil, en P-gp-hemmer, endret ikke permeabiliteten til ACT og ECH over Caco-2cellemonolag (figur 3), noe som indikerer at intakt ECH og ACT ikke var begrenset av P-gp-utstrømningspumpen. Våre tidligere studier viste at MRP2-proteiner ikke ble uttrykt i Caco-2-cellemonolag.[29] P-gp og MRP2-mediert utstrømning kan utelukkes i ECH- og ACT-transport. Noen glykosider av quercetin med lav lipofilisitet ble mer effektivt absorbert enn quercetin i seg selv.[30] Det er også viktig å merke seg at ACT med en sukkerdel distribueres raskt i hjernevev. Vår oppmerksomhet har vært fokusert på den kombinerte virkningen av to glukosetransportører i enterocytter: SGLT i børstegrensemembranen og tilrettelagt diffusjonsglukosetransport (GLUT) i den basolaterale membranen. Caco-2-cellekultur kan brukes som en modell for å studere floretin-sensitive GLUT2-, andphloridzin-sensitive SGLT1- og 2-transportører.[31–34]Glukose transporteres fra den apikale til den basolaterale siden av Caco-2 monolag med høy hastighet med en Pappof 36,8 ± 1,1×10−6 cm/s.[35] Den har et høyere Papp enn den transcellulære transportmarkøren propranolol (23,4 ± 2,8 × 10-6 cm/s). Som vist i tabell 2 hadde intakt ECH og ACT mye lavere Papp enn det som ble rapportert i glukose og passiv propranolol. Vi beregnet logaritmen til fordelingskoeffisienten (oktanol-vann), log P, ble beregnet til å være -2,32 og 0,077 for henholdsvis ECH og ACT. Polaror hydrofile forbindelser antas å bli transportert via en paracellulær bane (over trange veikryss). De to fenyletanoidglykosidene, som mannitol, ser ut til å bli transportert gjennom en paracellulær rute. Imidlertid reduserte phloridzin dramatisk den absorberende permeabiliteten til intakt ECH og ACT (tabell 2), noe som tyder på at apicalSGLT1 spiller en viktig rolle i tarmabsorpsjonen av intakt ECH og ACT. Ved en ekvivalent dose var høyere hydrofob ACT-permeabilitet nær ECH-permeabilitet (figur 2 og tabell 2). Yoshikawa et al. [36] har vist at fasiliterende transportører (GLUT 1 og 2), så vel som phloridzin-sensitive SGLT1, uttrykkes intensivt i tynntarmen. Siden absorberte mengder av forbindelser er basert på massebalansen mellom opptak og eliminering, evaluerte vi deltakelsen av GLUT2. Glukose krysser de apikale membranene til enterocytter med SGLT1 med høy affinitet og lav kapasitet og går ut over den basolaterale membranen gjennom GLUT2 med lav affinitet og høy kapasitet. Phloretin (en spesifikk hemmer av GLUT2) opphevet ikke transporten av intakt ECH og ACT (figur 3). Funes et al. [37] demonstrerte at ACT interagerte sterkt med fosfatgruppene til fosfolipidmembraner. Siden hydroksylgrupper er rikelig i ACT-strukturen, er hydrogenbindinger mellom disse gruppene og de polare glyserolhodene eller fosfatgruppene til fosfolipider de mest sannsynlige interaksjonene som vil finne sted. Når intakt ECH og dets ekvivalente ACT ble inkubert med Caco-2-monolag i 11 timer, var cellulær akkumulering av ACT (0,24 ± 0,04 nmol/cm2) tre ganger større enn den for ECH (0,07 ± 0,01 nmol/cm2). Vi trodde at SGLT1-sensitiv ECH og ACT sakte ble flyttet fra enterocytter til blodstrømmen, noe som muligens førte til den observerte lowPapp. Sammenlignet med svært hydrofil ECH, kan den lave permeabiliteten til ACT skyldes interkalering i cellemembraner.

Cistanche tubulosa ekstrakt

Polyfenoliske forbindelser konsumeres i urteblandinger under deres kliniske anvendelse og er kommersielt tilgjengelige som kosttilskudd. I en in vitro-studie ble det vist at absorpsjonen av fenolisk epicatechin ikke ble påvirket av ingredienssammensetningen til drikkevarematerialer. [38] I kontrast, Hypericum perforatumL. produktmatriser påvirker transporten av quercetinglucosider (rutin og isoquercitrin) og hyperosideover Caco-2-celler på grunn av forskjeller i matriksfytokjemisk sammensetning og transportegenskaper, dvs. paracellulær overføring og bærermediert eller aktiv transport.[39] I denne studien ga C. tubulosa en tre ganger høyere transepiteltransport enn intakt ECH og ACT (figur 2 og tabell 2). Vi spekulerer i at komponenter iCistanche tubulosa ekstraktaktivere den phloridzin-sensitive transporteren og/eller akselerere elimineringen av intracellulær ECH og ACT.Cistanche tubulosa ekstraktved den høye dosen så det ut til i stor grad å maskere styrken til floridzin-sensitiv transport (tabell 2). Kostholdskarbohydrater[40] og proteiner[41]interagerer med noen polyfenoler i mage-tarmkanalen. Morikawa et al.[10] demonstrerte at fem iridoider, kankanosider AD, og ​​kankanol, et monoterpenglykosid, kankanosid E, to fenyletanoide oligoglykosider, kankanosider F og G, og et acylert oligosukker, kankanose, kunne isoleres fraCistanche tubulosa ekstrakt

brukes for tiden. Andre ingredienser, inkludert proteiner iCistanche tubulosa ekstrakt, forbli uklart. Sammen med spekulasjonene ovenfor er vi designet for å undersøke om andre komponenter interagerer med SGLT1 og hemmer absorpsjonen av ECH og ACT.

In-vivo-eksperimenter kan ikke lett skille mellom omfanget av absorpsjon og unngåelse av first-pass-disponering gjennom leveren. Den in-situ intestinale perfusjonsmodellen har en fordel fremfor in vivo og in vitro-modeller på grunn av den enkle kontrollen av eksperimentparametere og utelukkelse av påvirkningen fra andre organer og vedlikehold av intakt intestinal blodtilførsel. [22] Involveringen av thephloridzin-sensitive glukosetransportøren ble evaluert i anin-situ intestinalt perfusjonssystem. Som vist i figur 5, absorberte mengder av ECH- og ACT-koncomitanter iCistanche tubulosa ekstrakt (low dose) were greatly abolished by phloridzin, which agrees with our in-vitro data (Figure 4). Using peptides and 20 drugs passively absorbed, a good correlation is obtained between in-vivo drug absorption and the drug permeability of Caco-2 monolayers.[42] Drugs with a Papp of >1 × 10−6 cm/s absorberes fullstendig hos mennesker, mens medikamenter og peptider er dårlig absorbert (<1% of="" dose)="" have="" papp="" values="" of=""><1 ×="" 10−7="" cm/s.="" surprisingly,="" the="" papp="" of="" the="" ech="" concomitant="" (high="" dose)="" was="">1 × 10−6 cm/s (tabell 2), noe som tyder på høy oral biotilgjengelighet hos dyr og mennesker. Crespy et al. [43] viste at effluks i en in-situ intestinal perfusjonsstudie ikke var signifikant forskjellig mellom phloridzin og phloretin. De [44] viste også at oral biotilgjengelighet av phloridzin med høy følsomhet for SGLT1 var bare 10 prosent hos rotter. Fremtidige studier må evaluere biotilgjengeligheten og hepatisk first-pass-effekt av ECH samtidig etter oral administrering av diettekstraktet i høy dose. In-situ resultater innebærer at inntaket avCistanche tubulosa ekstraktkan forbedre den lave orale absorpsjonen av intakt ECH og ACT.

Konklusjon

Kostholdet og det medisinskeCistanche tubulosa ekstraktForbedring av intestinal absorpsjon av ECH og ACT kan tjene til å bedre styre menneskers helse, selv om involveringen av floridzinsensitiv transport bør reduseres.

Erklæringer

Interessekonflikt

Forfatteren(e) erklærer(e) at de ikke har noen interessekonflikter å avsløre

Finansiering

Dette arbeidet ble delvis støttet av High-Tech ResearchCenter fra Kinki University.

Anerkjennelser

Forfatterne ønsker å takke Osamu Muraoka (Kinki University, Osaka, Japan) og Toshio Morikawa (Kinki University, Osaka, Japan) for leveringen avCistanche tubulosa ekstraktog rene bestanddeler. Vi er veldig takknemlige til Masahiro Iwaki (Kinki University) for studiestøtten.

Cistanche tubulosa ekstraktProdukter

Fra: Phloridzin-sensitiv transport av echinacosid og acteosid og endret tarmabsorpsjonsvei etter påføring avCistanche tubulosa ekstrakt' avTadatoshi Tanino et al

---© 2015 Royal Pharmaceutical Society, Journal of Pharmacy and Pharmacology, 67, s. 1457–1465,Fenyletanoide glukosider transportert av SGLT1

Referanser

1. Tanaka J et al. Effekten avCistanche tubulosa ekstraktpå ulike hjernesykdommer. Matstil 21 2008; 12:24–26.

2. Tanaka J et al. Anti-aldringsfunksjoner avCistanche tubulosa ekstrakt. Matstil 21 2008; 12:27–29.
3. Tanaka J et al. Skjønnhet og hårvekst funksjoner avCistanche tubulosa ekstrakt. Matstil 21 2008; 12:29–32.
4. Tanaka J et al. Fettmetaboliserende effekt avCistanche tubulosa ekstrakt. Matstil 21 2008; 12:30–33.
5. Yoshizawa F et al. Bestanddelene av Cistanche tubulosa Schrenk (Hook) f.II. isolering og struktur av et nytt fenyletanoidglykosid og et nytt neolignanglykosid. Chem Pharm Bull 1990; 38: 1927–1930.
6. Yoshikawa M et al. Fenyletanoide oligoglykosider og acylerte oligosukkere med vasorelakserende aktivitet fra Cistanche tubulosa. Bioorg Med Chem 2006; 14: 7468–7475.
7. Tu PF et al. Analyse av fenyletanoidglykosider av Herba cistances ved RP-HPLC. Yao Xue Xue Bao 1997; 32: 294–300.
8. Lei L et al. Metabolsk regulering av fenyletanoidglykosider fra Herba cistanches i hundens gastrointestinale. Yao Xue Xue Bao 2001; 36: 432–435.
9. Geng X et al. Nevroprotektive effekter av echinacoside i muse-MPTP-modellen av Parkinsons sykdom. Eur J Pharmacol 2007; 564: 66–74.
10. Morikawa T et al. Acylerte fenyletanoide oligoglykosider med hepatobeskyttende aktivitet fra ørkenplanten Cistanche tubulosa. Bioorg Med Chem 2010; 18: 1882–1890.
11. Paola RD et al. Effekter av verbascoside, bioteknologisk renset av syringa Vulgaris plantecellekulturer, i en gnagermodell av periodontitt. J Pharm Pharmacol 2011; 63: 707–717.
12. Wu YT et al. Bestemmelse av akteosid i Cistanche deserticola og Boschniakia rossica og dets farmakokinetikk i fritt bevegelige rotter ved bruk av LC-MS/MS. J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci 2006; 844: 89–95.
13. Matthias A et al. Permeabilitetsstudier av alkylamider og koffeinsyrekonjugater fra echinacea ved bruk av en kako-2-celle-monolagsmodell. J Clin Pharm Therapeut 2004; 29: 7–13.
14. Jia C et al. Bestemmelse av echinakosid i rotteserum ved omvendt fase høyytelses væskekromatografi med ultrafiolett deteksjon og dets anvendelse på farmakokinetikk og biotilgjengelighet. J Chromatogr 2006; 844: 308–313.
15. Cardinali A et al. Verbascosider fra olivenmøllevann: vurdering av deres biotilgjengelighet og tarmopptak ved bruk av et in vitro-fordøyelse/kako-2-modellsystem. J Food Sci 2011; 176: H48–H54.
16. Jia C et al. Metabolisme av echinacoside, en god antioksidant, hos rotter: isolering og identifikasjon av gallemetabolitter. Drug Metab Dispos 2009; 37: 431–438.
17. Najar IA et al. Modulering av P-glykoprotein ATPase-aktivitet av noen fytobestanddeler. Phytother Res 2009; 24: 454–458.
18. Walgren RA et al. Utstrømning av diettflavonoid quercetin 4'-beta-glukosid over human intestinal kako-2 cellemonolag av apikale multimedikamentresistensassosiert protein-2. J Pharmacol Exp Ther 2000a; 294: 830–836.
19. Walgren RA et al. Cellulært opptak av diettflavonoid quercetin 4'-beta-glukosidase av natriumavhengig glukosetransportør SGLT1. J Pharmacol Exp Ther 2000b; 294: 837–843.
20. Mihara K et al. Intestinal first-pass metabolisme av eperison hos rotte. Pharm Res 2001; 18: 1131–1137.
21. Isacchi B et al. Antihyperalgetisk aktivitet av verbascoside i to modeller av nevropatisk smerte. J Pharm Pharmacol 2011; 63: 594–601.

22. Cook TJ et al. Intestinal permeabilitet av klorpyrifos ved bruk av single-pass intestinal perfusjonsmetode hos rotte. Toxicology 2003; 184: 125–133.

23. Kumar YS et al. P-glykoprotein- og cytokrom P-450-mediert urtemedikamentinteraksjon. Drug Metabol Drug Interact 2010; 25:3–16.
24. Walle UK et al. Transport av genistein-7-glukosid av humane intestinale CACO-2-celler: en potensiell rolle for MRP2. Res Commun Mol Pathol Pharmacol 1999; 103: 45–56.
25. Ito K et al. Apikal/basolateral overflateekspresjon av medikamenttransportører og dens rolle i vektoriell medikamenttransport. Pharm Res 2005; 22: 1559–1577.
26. Laitinen L et al. Caco-2 cellekulturer i vurdering av intestinal absorpsjon: effekter av noen samtidig administrerte legemidler og naturlige forbindelser i biologiske matriser. (University of Helsinki, Finland, 2006) Akademisk avhandling, s. 1–66.
27. Scambia G et al. Quercetin potenserer effekten av adriamycin i en multiresistent MCF-7 human brystkreftcellelinje: P-glykoprotein som et mulig mål. Cancer Chemother Pharmacol 1994; 34: 459–464.
28. Choi DH et al. Effekt av myricetin, en antioksidant, på farmakokinetikken til losartan og dets aktive metabolitt, EXP-3174, hos rotter: mulig rolle for cytokrom P450 3A4, cytokrom P450 2C9 og P- glykoprotein hemming av myricetin. J Pharm Pharmacol 2010; 62: 908–914.
29. Tanino T et al. Paclitaxel-2′-etylkarbonat-prodrug kan omgå P-glykoprotein-mediert cellulær utstrømning for å øke legemiddelets cytotoksisitet. Pharm Res 2007; 24: 555–565.
30. Hollman PC et al. Absorpsjon av kostholdsquercetinglykosider og quercetin hos friske ileostomifrivillige. Am J Clin Nutr 1995; 62: 1276-1282.
31. Kellett GL et al. Den diffusive komponenten av intestinal glukoseabsorpsjon formidles av den glukoseinduserte rekrutteringen av GLUT2 til børstebrettets membran. Biochem J 2000; 350: 155–162.
32. Sak K et al. Sortering av endogene plasmamembranproteiner skjer fra to steder i dyrkede humane tarmepitelceller (Caco-2). Cell 1990; 60: 429–437.
33. Mahraoui L et al. Tilstedeværelse og differensiell ekspresjon av SGLT1, GLUT1, GLUT2, GLUT3 og GLUT5 heksosetransporter mRNA i Caco-2 cellekloner i forhold til cellevekst og glukoseforbruk. Biochem J 1994; 298: 629–633.

34. Mesonero J et al. Sukkeravhengig uttrykk for fruktosetransportøren GLUT 5 i Cac-2-celler. Biochem J 1995; 312: 757-762.

35. Walgren RA et al. Transport av quercetin og dets glukosider over humane tarmepitel-Caco-2-celler. Biochem Pharmacol 1998; 55: 1721–1727.
36. Yoshikawa T et al. Sammenlignende uttrykk for heksosetransportører (SGLT1, GLUT1, GLUT2 og GLUT5) gjennom musens mage-tarmkanal. Histochem Cell Biol 2011; 135: 183–194.
37. Funes L et al. Effekter av verbascoside, et fenylpropanoidglykosid fra sitronverbena, på fosfolipidmodellmembraner. Chem Phys Lipids 2010; 163: 190–199.
38. Neilson AP et al. Påvirkning av sjokoladematrisesammensetningen på kakaoflavan-3-ol biotilgjengelighet in vitro og biotilgjengelighet hos mennesker. J Agric Food Chem 2009; 57: 9418–9426.
39. Gao S et al. Svært varierende innhold av fenoler i johannesurtprodukter påvirker transporten i den humane intestinale Caco-2-cellemodellen: farmasøytisk og biofarmasøytisk begrunnelse for produktstandardisering. J Agric Food Chem 2010; 58: 6650–6659.
40. Schramm DD et al. Mateffekter på absorpsjonen og farmakokinetikken til kakaoflavanoler. Life Sci 2003; 73: 857–869.
41. Laurent C et al. Etanol og polyfenolfri vinmatrise stimulerer differensieringen av humane intestinale Caco-2-celler. Påvirkning av deres assosiasjon med et procyanidin-rikt druekjerneekstrakt. J Agric Food Chem 2005; 53: 5541–5548.
42. Artursson P et al. Korrelasjon mellom oral medikamentabsorpsjon hos mennesker og tilsynelatende legemiddelpermeabilitetskoeffisienter i humane indre epitelceller (Caco-2). Biochem Biophys Res Commun 1991; 175: 880–885.
43. Crespy V et al. Sammenligning av intestinal absorpsjon av quercetin, phloretin og deres glukosider hos rotter. J Nutr 2001a; 131: 2109–2114.
44. Crespy V et al. Biotilgjengelighet av phloretin og phloridzin hos rotter. J Nutr 2001b; 131: 3227–3230.