Proteaseaktivert reseptor 1 bidrar til mikrosirkulasjonssvikt og tubulær skade i nyreiskemi-reperfusjonsskade hos mus

Yu Guan,¹Daisuke Nakano,²Lei Li,³Haofeng Zheng,³Akira Nishiyama,²Du Tian,¹og Lei Zhang¹

å avhjelpe faktisk svikt medcistanche urt

1. Introduksjon

Denyrekan ikke unngå iskemi-reperfusjon (IR) skade under delvis nefrektomi ognyretransplantasjon [1], som er kjent for å resultere i retensjon av metabolske avfallsprodukter og føre til akuttnyreskade (AKI) ogAKI-kronisknyresykdom (AKI-CKD) [2]. Til dags dato er ingen spesifikk medikamentell behandling klinisk tilgjengelig for AKI og AKI-CKD [3]. Flere vanlige patologiske endringer forekommer i AKI, som mikrosirkulasjonssvikt [4], inkludert overbelastning og blødning, og akutt tubulær nekrose [5]. Derfor har studier fokusert på å målrette disse patologiske endringene som potensielle terapeutiske kandidater. Vi har tidligere vist at å opprettholde de peritubulære kapillærene etternyreIR-skade reduserte kapillæroverbelastning og forbedret overgangen fra AKI til CKD [6]. Akutt tubulær nekrose kan være vanskelig å behandle; dermed kan regenerering av tubuli gjennom tubulær celleproliferasjon være en viktig tilnærming for å forhindre ytterligere tap av nyrefunksjon [7].

Proteaseaktivert reseptor-1 (PAR-1) tilhører familien av proteaseaktiverte reseptorer (PAR) og er kjent for å stimuleres av trombin for å indusere blodplatekoagulasjon. Vi har nylig vist at PAR-1 bidro til utviklingen av akutt indusert glomerulær skade [8]. I tillegg ble trombin/PAR-1 rapportert å spille en rolle i epitelcelleproliferasjon og apoptose. Basert på disse egenskapene antok vi at PAR-1 akselererte AKI-alvorlighet ved å regulere enten peritubulær kapillær blodkoagulasjon eller tubulær regenerering. I denne studien undersøkte vi rollen til PAR-1 ved å bruke Q-94, en PAR-1-selektiv negativ allosterisk modulator, i en musnyreIR-skademodell og trombinstimulerte dyrkede humane tubulære celler.

Ta kontakt med:joanna.jia@wecistanche.com

2. Materialer og metoder

2.1. Akutt nyre IR musemodell.

Alle dyreforsøk ble utført i henhold til Institusjonelle dyrepleie- og brukskomiteens eksperimentelle retningslinjer fra Capital Medical University. DenyreIR musemodell ble etablert som tidligere beskrevet [8]. Kort fortalt ble 8-uke gamle C57/BL6 hannmus bedøvet ved injeksjon av pentobarbitalnatrium (50 mg/kg; ip) og tilfeldig delt inn i følgende grupper: sham, I/R pluss vehikel og I/R (bærer: saltvann 10 mg/kg iv) pluss Q94 (en PAR-1-antagonist ved 10 mg/kg iv) grupper (n=7–8 i hver gruppe). For nyre-varm IR-skadeprotokollen gjennomgikk musene uninefrektomi for å evaluere skaden på nyrefunksjonen; etter en uke ble nyrepedikelen klemt fast med skadefrie vaskulære klips i 30 min. Etter reperfusjon i 48 timer ble musene avlivet; deres nyrevevsprøver ble samlet og fiksert i 4 prosent paraformaldehydløsning for å fremstille parafinblokker. Plasma ble oppnådd for å måle blod urea nitrogen (BUN) og kreatinin.

2.2. Materialer.

Q94 ble kjøpt fra Tocris Bioscience (Bristol, Storbritannia). Andre kjemikalier ble hentet fra Sigma Aldrich (St. Louis, MO, USA) med mindre annet er angitt.

2.3. Assay for kreatinin og BUN.

Kommersielle analysesett (Creatinine Assay Kit ab65340; Abcam, Cambridge, UK) ble brukt for å måle kreatinin. BUN-analysesett ble kjøpt fra ABSBio™ (UREA NITROGEN Kit, CNHAO BIO, Beijing, Kina).

2.4. Histologi.

Før innstøping i parafin ble nyrevevet fiksert med 4 prosent paraformaldehyd. Nyreparafinblokker ble kuttet i 2 μm seksjoner og montert på objektglass over natten ved 25 grader C. Etter avparafinisering ble snittene farget med hematoksylin og eosin (H&E). Bilder ble tatt med et mikroskop (BX-51/DP-72; Olympus, Tokyo, Japan). Som tidligere beskrevet [9] ble skade på nyre-tubuli diagnostisert basert på flere histopatologiske endringer, som tubulær dilatasjon, kongestion/blødning, tap av børstekanter, dannelse av tubulær gips og cellelyse med utslettet rusk i det tubulære lumen. Rørskader ble skåret i henhold til prosentandelen av skadede tubuli: 0, ingen skade; 1,<25%; 2,="" 25–50%;="" 3,="" 51–75%;="" and="" 4,="">75 prosent. Scoring ble utført på en blind måte.

2.5. Immunfluorescens og immunhistokjemi.

Seksjoner ble preparert som beskrevet for histologianalysen (H&E) og deretter inkubert med 0,3 prosent hydrogenperoksid i 30 minutter for å blokkere endogene peroksidaser etter avparafinisering med xylen. For antigeninnhenting ble seksjonene inkubert med proteinase K (DAKO Cytomation, Glostrup, Danmark) i 10 min. Etter blokkering med 10 prosent geiteserum ble seksjonene inkubert med primære antistoffer over natten ved 4 grader C (anti-Kim 1 antistoff, ab47635, Abcam; anti Ki67 antistoff, ab15580, Abcam; anti-PAR-1 antistoff, ab32611 , Abcam). Etter inkubasjon med det primære antistoffet, ble seksjonene inkubert med det sekundære antistoffet ved 25 grader C i 1 time. DAB-substrat (DAKO) ble brukt til å visualisere fargeresultatene for immunhistokjemi (IHC). Fluorescenssignaler ble oppdaget ved hjelp av et Alexa Fluor 594-merket sekundært antistoff. Bildene ble tatt med et FL-fluorescensmikroskop (BX51; Olympus) med et passende filter. ImageJ-programvare (NIH, Bethesda, MD, USA) ble brukt til å analysere de positive områdene.

2.6. Sanntids PCR.

For å evaluere reguleringen av mRNA-ekspresjon under disse forholdene, ble mRNA isolert fra nyrevev. Et PCR-system (7300 Fast Real-Time; Applied Biosystems, Foster City, CA, USA) og Light Cycler Fast Start DNA Master SYBR Green I-sett (Applied Biosystems) ble brukt til å oppdage nivåene av 18S og PAR-1 mRNA. Primersekvenser var som følger: 18S —5' -GTAACCCGTTGAACCCCATT-3', 5'-CCATCCAATCG GTAGTAGCG-3'; PAR-1—5′-GTTGATCGTTTCCACG GTCT-3′, 5′-GCTGCCTCTGTACCAGGACT-3′. Relative mRNA-nivåer ble bestemt ved å bruke 2−ΔΔCq-metoden. ΔΔCq-verdien ble beregnet ved å bruke data fra kontrollgruppen.

2.7. Kirurgisk prosedyre og In Vivo Multiphoton Imaging-innstillinger.

Musene ble bedøvet med 2 prosent isofluran (Mylan, Osaka, Japan). Etter trakeotomi ble halsvenen kanylert for fluorescerende fargeinjeksjon og infusjon av vedlikeholdsvæske, som besto av 1,0μL/min av 2 prosent albumin i fosfatbufret saltvann. Den venstre nyren til hver mus ble eksteriorisert gjennom et lite flankesnitt og festet til et dekkglass. Mikroskopstadiet og dyrene ble varmet opp med en varmepute under alle eksperimentelle prosedyrer. Intravital multifotonmikroskopi ble utført ved bruk av et Olympus FV1000MPE multifoton konfokalt fluorescensavbildningssystem drevet av en Chameleon Ultra-II MP-laser ved 860nm (Coherent, Inc., Santa Clara, CA, USA). Mikroskopobjektivet var en 25x vannnedsenkningslinse med 1,05 numerisk blenderåpning. Bildeinnstillingene for mikroskopet (forsterkning og forskyvning for alle tre kanalene; blå, grønn og rød) ble fikset gjennom hele eksperimentet. Etter en 30 minutters restitusjonsperiode ble rhodamine B- 70kD dekstran injisert intravenøst, og 3-D z-stack-bilder ble tatt på dybder på 5–50 μm (2μm fra hverandre) fra nyreoverflaten.

2.8. Cellekultur.

Human nyre 2 (HK2) celler ble hentet fra Cell Bank of Academy Sciences (Shanghai, Kina) og dyrket som tidligere beskrevet [10]. Cellene ble dyrket i Dulbeccos modifiserte Eagle-medium supplert med 10 prosent føtalt bovint serum og 1 prosent penicillin-streptomycin i en fuktet atmosfære av 95 prosent luft og 5 prosent CO2 ved 37 grader.

2.9. WST-1-analyser for å evaluere celleproliferasjon.

HK2-celler ble sådd inn i 6-brønnplater med en tetthet på 1×104 celler/brønn. Etter stimulering av HK2-cellene med trombin, ble WST- 1-analyser utført i henhold til produsentens protokoll (katalog #C0035; Beyotime, Shanghai, Kina) for å bestemme celles spredningsevne. Etter 2 timers inkubering med 100 μL WST-1-reagens i hver brønn, ble absorbansen til prøvene målt ved hjelp av en mikroplateleser ved en bølgelengde på 450 nm.

2.10. Caspase-3-analyse.

Caspase-3-aktivitet ble målt ved å bruke et kommersielt tilgjengelig caspase-3-aktivitetssett (katalog #C1116; Beyotime, Shanghai, Kina) [11]. Etter inkubasjon med caspase-3-aktivitetssettet-reagenset, ble absorbansen til prøvene detektert ved bruk av en mikroplateleser (Spectra-Max M2, Molecular Devices, Sunnyvale, CA, USA) ved 405 nm i henhold til produsentens instruksjoner.

2.11. Data og statistisk analyse.

Enveis variansanalyse ble brukt til å sammenligne flere grupper, etterfulgt av Tukeys multiple sammenligningstest. For å sammenligne to individuelle grupper brukte vi Students t-test. p < 0:05="" ble="" ansett="" for="" å="" indikere="" statistisk="" signifikante="">

Cistanche tubulosaforhindrer nyresykdom

3. Resultater

3.1. PAR-1 uttrykk i IR-nyren.

Vi bekreftet først uttrykket av PAR-1 og effekten av IR på uttrykksnivået inyre. Vi observerte en nesten 2- ganger økning i ekspresjonsnivået til PAR-1-mRNA sammenlignet med det i sham-kirurgimus ved 48 timer (figur 1(a)). Vi målte også ekspresjonen av PAR-1 ved immunfluorescens 48 timer etter IR. PAR-1 ble uttrykt i den rørformede cellebørstens kantmembran. Nivået av PAR-1 FL-fluorescens ble oppregulert sammenlignet med falske gruppemus (figur 1(b) og 1(c)). Disse dataene tyder på at både lokaliseringen av PAR-1 i tubulære celler og dets ekspresjonsnivå ble oppregulert etter IR i nyrene.

3.2. Nyrefunksjon og histopatologiske endringer. Vi vurdertenyrefunksjon ved å oppdage BUN- og kreatininnivåer i plasma. I/R induserte en økning i nivåene av BUN og kreatinin sammenlignet med mus som ble utsatt for falsk kirurgi. Dessuten ble den IR-induserte økningen i BUN-nivået betydelig redusert hos Q94-behandlede mus (figur 2(a)). Serumkreatininnivået ble hemmet i Q94--behandlede mus sammenlignet med mus som bare ble utsatt for IR-kirurgi (figur 2(b)). Disse dataene tyder på at administrasjonen av Q94 kan beskyttenyrefunksjon etter IR-skade.

Vi evaluerte også nyrehistopatologiske endringer ved å utføre H&E-farging. Renal IR økte signifikant gipsdannelse, tubulær dilatasjon og tap av børstekanter og lunger/blødninger hos de vehikelbehandlede musene sammenlignet med falske mus. Q94-behandling undertrykte markant disse endringene indusert av IR (figur 2(c) og 3(a)). Analyse av H&E-fargingsresultatene mellom grupper avslørte tetthets-/blødningsscore og tubulær skadescore for hver gruppe. Q94-gruppemusene viste en mye lavere poengsum (figur 2(e) og 3(c)). Vi farget også Kim-1 som ennyreskademarkør for renale tubulære celler av IHC [12]. Kim-1-positive områder ble økt i det renale tubulære området hos mus med IR-fornærmelse, som ble signifikant undertrykt av Q94 (figur 2(d) og 2(f)). Disse dataene tyder på at Q94 kan undertrykkenyretubulær skade forårsaket av IR-skade.

3.3. Unormal blodcellestrøm i in vivo-avbildning.

PAR-1 og dets ligand trombin spiller viktige roller i overbelastning; Q94 forbedret overbelastningen betydelig. Derfor utførte vi intravital avbildning ved multifotonmikroskopi. Dette muliggjør observasjon av blodcelle-karlen i den peritubulære kapillæren i sanntid i levende mus (figur 3(c)). Plasma ble visualisert med 70 kDa dekstran konjugert med rhodamin B (figur 3(d)). Blodceller som ikke genererer FL-fluorescens som respons på laseren ble brukt til å eksitere rhodamin B og avbildet som skygger. Som vist i figur 3(e), forstyrret nyre-IR den vanlige blodcellefølgingen og induserte mikrosirkulasjonssvikt. Q94 forbedret peritubulære kapillære blodceller.

3.4. Tubulær celleproliferasjon etter IR-skade.

Det er rapportert at proliferativ regenerering av tubulære celler spiller en viktig rolle i gjenopprettingen av den tubulære strukturen og nyrefunksjonen etter IR-skade. PAR-1 er kjent for å modifisere spredningen av epitelceller når den aktiveres av trombin. Vi oppdaget dermed spredningen av renale tubulære celler i en Ki-67 IHC-analyse. 48 timer etter IR ble antallet prolifererende Ki-67--positive tubulære celler økt. Q94 forsterket ytterligere det økte antallet Ki-67--positive rørformede celler etter IR sammenlignet med det i bare IR-behandlede mus (figur 4(a) og 4(b)). I tillegg sjekket vi om celleproliferasjonsevnen ble påvirket av hemming av PAR-1 in vitro-eksperimenter ved bruk av HK2-celler inkubert med trombin, en PAR-1-agonist. Den proliferative aktiviteten til HK2-celler ble målt ved WST-1-analyse. Som vist i figur 4(c), ble proliferasjonen av HK2-celler dramatisk undertrykt etter behandling med trombin. Imidlertid ble denne trombininduserte inhiberingen nesten opphevet av Q94. Disse dataene indikerer at PAR-1 negativt regulerte spredningen av renale tubulære celler, som nesten ble opphevet av Q94 PAR-1-antagonisten.

å lindre den kroniske nyresykdommen medcistanche

3.5. Renal Tubular Cell Apoptose.

Vi undersøkte videre apoptose av nyreceller ved å bruke caspase-3, som er den viktigste bøddelens kaspase og aktiveres av både indre og ytre veier under apoptose [13]. Ved å bruke trombininkuberte dyrkede HK2-celler fant vi at trombin økte aktiviteten til caspase-3. Dessuten undertrykte administrasjonen av Q94 aktiviteten til caspase-3 (Figur 4(d)). Disse dataene tyder på at trombinindusert apoptose av HK2-celler ble hemmet av Q94 PAR-1-antagonisten.

4. Diskusjon

NyreIR-skade er preget av overbelastning/blødning, akutt tubulær nekrose, inflammasjon og avsetning av gipsdannelse [5]. Her viste vi at hemming av PAR-1 forbedret både blodkarassosiert forandring og tubulointerstitielle endringer. Det er velkjent at PAR-1 og dets ligand, trombin, spiller viktige roller i blodplatekoagulering, og interferens av dette systemet, slik som av trombomodulin [14, 15], kan forhindre AKI. Vi viste at PAR- 1-hemming undertrykte overbelastning og forbedret blodstrømmen i de peritubulære kapillærene hos mus med nyreskade, noe som tyder på at PAR-1-systemet forverret mikrosirkulasjonen. I tillegg ble ekspresjonsnivået til PAR-1 oppregulert i tubuli etter nyre-IR-skade, noe som indikerer at det PAR-1-avhengige systemet i tubuli også overdriver nyre-IR-skade. Det er godt etablert at regenerering av tubulære celler er en viktig prosess for å gjenoppbygge den tubulære strukturen og for å gjenopprette nyrefunksjonen etter IR-skade [16, 17]. Avhengig av skadegraden er ikke denne reparasjonskapasiteten ubegrenset [18]. Derfor er behandlingsalternativer for å dempe skade i tubulære celler eller akselerere spredningen deres påtrengende. Vår in vitro-studie viste at PAR- 1/trombin negativt regulerte proliferasjonen av tubulære celler, som igjen ble akselerert etter hemming av PAR-1. Videre ble IR-skade hos mus vist å øke tubulær proliferasjon etter 48 timer, med en ytterligere økning etter PAR-1-hemming. Vi fant at PAR-1 var økt i børstekantmembranen til proksimale tubuli. Siden det har blitt rapportert at funksjonen til den glomerulære filtrasjonsbarrieren reduseres under nyre-IR-skade [19], kan det filtrerte trombinet fra glomeruli aktivere den økte PAR- 1, og dermed forstyrre tubulær regenerering.

Resultatene våre tyder på at PAR-1/trombin-systemet undertrykte spredningen av tubulære celler og økte apoptose. En annen studie viste imidlertid motsatte effekter av PAR-1 når den ble aktivert av protein C [20, 21]. Denne tilsynelatende motstridende rollen til PAR-1 kan avhenge av aktiveringsmetoden. I vår studie var en mulig forklaring på dens tilskrevne rolle at PAR-1 ble aktivert av filtrert trombin. Størrelsen på protein C er over 60 kDa, som ligner på albumin [22, 23] og mye større enn trombin (36 kDa). Dessuten er plasmakonsentrasjonen (<100 nm)="" is="" less="" than="" 10%="" of="" thrombin="" (="">1 μM), noe som indikerer at protein C gjennomgår mindre filtrering og produserte et svakere signal sammenlignet med trombin.

Trombotiske episoder er en risikofaktor for pasienter med nyresvikt i sluttstadiet [24]. En studie viste at PAR-1-mangel beskyttet mot diabetisk CKD [25]. I vår studie observerte vi effekten av hemming av PAR-1 på nyrefunksjonen i en tidlig fase etter IR. I videre studier har vi til hensikt å utvikle en kronisknyreIR-indusert sykdomsmodell [2] for å evaluere den potensielle koblingen mellom PAR-1 og CKD.

Avslutningsvis demonstrerte vi at PAR-1 forverret mikrosirkulasjonssvikt og negativt regulerte spredningen av tubulære celler. I motsetning til dette bidro hemming av PAR-1 til å forbedre mikrosirkulasjonen og proliferasjonen av tubulære celler og etter IR, og fungerte som en fremtredende mekanisme for nyregjenoppretting, og bør betraktes som en ny strategi i behandlingen av AKI.

Cistanche tubulosa forhindrer nyresykdom, klikk her for å få prøven

1 Avdeling for urologi, Beijing Friendship Hospital, Capital Medical University, Beijing, Kina

2 Institutt for farmakologi, Kagawa University, Kagawa, Japan

3Division of Kidney Transplantation, Department of Surgery, The Third Affiliated Hospital of Sun Yat-sen University,

Guangzhou, Kina

Korrespondanse skal rettes til Ye Tian; kidney@ccmu.edu.cn og Lei Zhang; leizhangkidney@gmail.com Mottatt 1. januar 2021; Revidert 25. januar 2021; Godtatt 8. februar 2021; Publisert 23. februar 2021

Akademisk redaktør: Junyan Liu

Copyright © 2021 Yu Guan et al. Dette er en artikkel med åpen tilgang distribuert underCreative Commons Attribution License, som tillater ubegrenset bruk, distribusjon og reproduksjon i ethvert medium, forutsatt at originalverket er korrekt sitert.

Iskemi-reperfusjon- (IR-) indusert nyreskade er vanskelig å unngå under nyretransplantasjon og robotassistert partiell nefrektomi. Renal IR-skade er preget av tubulær skade, mikrosirkulasjonssvikt og betennelse, som koordinert forsterker nyreskade; Det er imidlertid ingen spesifikk behandling tilgjengelig for disse tilstandene. Proteaseaktivert reseptor-1 (PAR-1) og dens ligand, trombin, er involvert i koagulasjon og ble vist å være assosiert med epitelcelleskade. Her antok vi at PAR-1 overdrev nyre-IR-indusert tubulær celleskade og mikrosirkulasjonssvikt, og at farmakologisk hemming av PAR-1 av Q94 kunne forhindre disse skadene. Renal varm IR økte uttrykket av PAR-1 i nyretubuli. Q94 svekket nyre-IR-induserte endringer og histopatologisk skade. Mikrosirkulasjonssvikt ble analysert ved overbelastning i histopatologien, og blodcellestrømmen undersøkt ved intravital multifotonmikroskopi ble undertrykt ved Q94-behandling. Q94 økte også dramatisk tubulær celleproliferasjon til tross for lavere nyreskade. Trombin undertrykte celleproliferasjon og induserte apoptose i tubuli; disse effektene ble forhindret av Q94-behandling. Til sammen var PAR-1 assosiert med nyre-IR-skade. Hemming av PAR-1 forbedret skade, muligens ved å forbedre nyremikrosirkulasjonen og overlevelse/proliferasjon av tubulære celler.

Data Availability

Forfatterne bekrefter at dataene som støtter funnene i denne studien er tilgjengelig i artikkelen.

Cpåflicts of Interest

Alle forfattere har erklært at de ikke har noen konkurrerende interesser.

Authors' Cpåtributipås

Yu Guan og Daisuke Nakano skrev manuskriptet og utførte dyreforsøk. Lei Li utførte in vitro-eksperimenter. Haofeng Zheng utførte den statistiske analysen. Akira Nishiyama reviderte manuskriptet. Lei Zhang og Ye Tian designet denne studien.

Acknowledgments

Denne studien ble støttet av National Natural Science Foundation of China (nr. 82000712) og China Postdoctoral Science Foundation (nr. 2020M670385).

Referanser

[1] MN Simmons, MJ Schreiber og IS Gill, "Surgical renal ischemia: a contemporary overview," The Journal of Urology., vol. 180, nei. 1, s. 19–30, 2008.

[2] Y. Guan, D. Nakano, Y. Zhang, L. Li, Y. Tian og A. Nishiyama, "En musemodell av nyrefibrose for å overvinne den tekniske variasjonen i iskemi/reperfusjonsskade blant operatører," Scientific Rapporter, vol. 9, nei. 1, s. 10435, 2019. 7 BioMed Research International

[3] M. Joannidis og PGH Metnitz, "Epidemiology and natural history of acute renal failure in ICU," Critical Care Clinics, vol. 21, nei. 2, s. 239–249, 2005.

[4] D. Nakano, K. Doi, H. Kitamura, et al., "Reduksjon av rørformet strømningshastighet som en mekanisme for oliguri i den tidlige fasen av endotoksemi avslørt ved intravital avbildning," Journal of the Ameri can Society of Nephrology , vol. 26, nei. 12, s. 3035–3044, 2015.

[5] D. Nakano og A. Nishiyama, "Multiphoton imaging of kidney patophysiology," Journal of Pharmacological Sciences, vol. 132, nr. 1, s. 1–5, 2016.

[6] Y. Zhang, D. Nakano, Y. Guan, et al., "En natrium-glukose cotransporter 2-hemmer demper nyrekapillærskade og fibrose av en vaskulær endotelial vekstfaktoravhengig vei etter nyreskade hos mus," Nyre International, vol. 94, nei. 3, s. 524–535, 2018.

[7] S. Nishioka, D. Nakano, K. Kitada, et al., "Den syklinavhengige kinasehemmeren p21 er essensiell for de gunstige effektene av renal iskemisk prekondisjonering på nyreiskemi/reperfusjonsskade hos mus," Kidney International, vol. 85, nei. 4, s. 871–879, 2014.

[8] Y. Guan, D. Nakano, Y. Zhang, et al., "En proteaseaktivert reseptor-1-antagonist beskytter mot podocyttskade i en musemodell av nefropati," Journal of Pharmacological Sciences, vol. 135, nr. 2, s. 81–88, 2017.

[9] M. Jiang, Q. Wei, G. Dong, M. Komatsu, Y. Su og Z. Dong, "Autofagi i proksimale tubuli beskytter mot akutt nyreskade," Kidney International, vol. 82, nei. 12, s. 1271–1283, 2012.

[10] X. Hu, M. Su, J. Lin, et al., "Corin er nedregulert ved nyreiskemi/reperfusjonsskade og er assosiert med forsinket graftfunksjon etter nyretransplantasjon," Disease Markers, vol. 2019, artikkel-ID 9429323, 8 sider, 2019.

[11] P. Wang, H. Wang, Q. Huang, et al., "Eksosomer fra M1--polariserte makrofager øker paklitaksel-antitumoraktivitet ved å aktivere makrofagmediert betennelse," Theranostics., vol. 9, nei. 6, s. 1714–1727, 2019.

[12] L. Yang, CR Brooks, S. Xiao, et al., "KIM-1-mediert fagocytose reduserer akutt skade på nyrene," The Journal of Clinical Investigation, vol. 125, nei. 4, s. 1620–1636, 2015.

[13] L. Xu, X. Li, F. Zhang, L. Wu, Z. Dong og D. Zhang, "EGFR driver utviklingen av AKI til CKD gjennom HIPK2-overuttrykk," Theranostics., vol. 9, nei. 9, s. 2712–2726, 2019.

[14] T. Hifumi, D. Nakano, J. Chiba, et al., "Kombinert terapi med gass gangren antitoksin og rekombinant humant løselig trombomodulin for _Clostridium perfringens_ sepsis i en rottemodell, "Toxicon, vol. 141, s. 112–117, 2018.

[15] N. Hayase, K. Doi, T. Hiruma, et al., "Rekombinant trombomodulin forhindrer akutt lungeskade indusert av nyreiskemi-reperfusjonsskade," Scientific Reports, vol. 10, nei. 1, s. 289, 2020.

[16] E. Lazzeri, ML Angelotti, A. Paired et al., "Endosyklus-relatert tubulær cellehypertrofi og progenitorproliferasjon gjenoppretter nyrefunksjonen etter akutt nyreskade," Nature Communications, vol. 9, nei. 1, s. 1344, 2018.

[17] K. Takaori, J. Nakamura, S. Yamamoto, et al., "Alvorlighetsgrad og frekvens av proksimal tubuliskade bestemmer nyreprognose," Journal of the American Society of Nephrology: JASN, vol. 27, nei. 8, s. 2393–2406, 2016.

[18] BD Humphreys, MT Valerius, A. Kobayashi, et al., "Indre epitelceller reparerer nyrene etter skade," Cell Stem Cell, vol. 2, nei. 3, s. 284–291, 2008.

[19] R. Wakasaki, K. Matsushita, K. Golgotiu, et al., "Glomerular filtrate proteins in acute cardiorenal syndrome," JCI Insight, vol. 4, nei. 4, 2019.

[20] M. Riewald, RJ Petrovan, A. Donner, BM Mueller og W. Ruf, "Aktivering av endotelcelleprotease-aktivert reseptor 1 ved protein C-banen," Science, vol. 296, nr. 5574, s. 1880–1882, 2002.

[21] MJ Ludeman, H. Kataoka, Y. Srinivasan, NL Esmon, CT Esmon og SR Coughlin, "PAR1-spalting og signalering som svar på aktivert protein C og trombin∗," The Journal of Biological Chemistry, vol. 280, nei. 13, s. 13122–13128,

2005.

[22] JH Griffin, BV Zlokovic og LO Mosnier, "Activated protein C: biased for translation," Blood, vol. 125, nei. 19, s. 2898–2907, 2015.

[23] R. Essalmani, D. Susan-Resiga, J. Guillemot, et al., "Trombinaktivering av protein C krever forutgående prosessering av en leverproproteinkonvertase," The Journal of Biological Chemistry, vol. 292, nr. 25, s. 10564–10573, 2017.

[24] S. Van Laecke og W. Van Biesen, "Alvorlig hypertensjon med renal trombotisk mikroangiopati: hva skjedde med den vanlige mistenkte?", Kidney International, vol. 91, nei. 6, s. 1271–1274, 2017.

[25] M. Waasdorp, J. Duitman, S. Florquin og CA Spek, "Protease-aktivert reseptor-1-mangel beskytter mot streptozotocin-indusert diabetisk nefropati hos mus," Scientific Reports, vol. 6, nei. 1, s. 33030, 2016.