Epigallocatechin-3-Gallate-forbedret jernakkumulering og apoptose og fremmet nevronal regenerering og hukommelse/kognitive funksjoner i hippocampus indusert av eksponering for et kronisk hypoksimiljø i høye høyder

Abstrakt

Vi hadde som mål å utforske de beskyttende effektene og potensielle behandlingsmekanismene til Epigallocatechin-3-gallate (EGCG) i en dyremodell for kronisk eksponering i et naturlig høyhøydehypoksi (HAH)-miljø. Atferdsendringer ble vurdert med Morris vannlabyrint-test. Jernakkumulering i hippocampus ble påvist ved å bruke henholdsvis DAB-forsterket Perls farging, MR, qPCR og kolorimetri. Oksidativt stress (malondialdehyd, MDA), apoptose (Caspase-3) og neural regenerering (hjerneavledet nevrotrofisk faktor, BDNF) ble påvist ved bruk av ELISA og western blotting. Neurale ultrastrukturelle endringer ble evaluert ved transmisjonselektronmikroskopi (TEM).

Forholdet mellom apoptose og hukommelse har alltid vært et av de hete temaene til nevrovitenskapsmenn. Apoptose refererer til prosessen med ordnet celledød gjennom en rekke interne reguleringsmekanismer. Under normale omstendigheter forårsaker ikke celleapoptose noen skade på menneskekroppen, men bidrar til å opprettholde god helse. Men under visse patologiske forhold kan ukontrollert apoptose føre til forekomst av ulike sykdommer.

Samtidig har hukommelsen også vist seg å være nært knyttet til celleapoptose. Noen studier tyder på at passende apoptose spiller en viktig rolle i dannelsen og konsolideringen av hukommelsen. Dette forholdet følger en enkel regel: noen unødvendige eller utgåtte nevroner fjernes gjennom apoptose, noe som skaper mer plass og ressurser for dannelse av nye nevroner og minnelagring. I tillegg kan passende apoptose også beskytte nevroner mot skade ved å eliminere giftige proteiner i nevroner.

Men hvis det er overdreven eller utilstrekkelig apoptose, vil det påvirke hukommelsens normale funksjon. Overdreven apoptose kan føre til overdreven tap av nevroner, noe som fører til hukommelsestap. På den annen side, hvis det ikke er nok apoptose til å fjerne unødvendige nevroner og celler, vil disse cellene forbruke for mye begrenset plass og ressurser, noe som også kan føre til hukommelsessvikt. Derfor er det nødvendig å unngå overdreven eller utilstrekkelig apoptose samtidig som den normale graden av apoptose opprettholdes.

Apoptose er en kompleks biologisk prosess med mange påvirkningsfaktorer. Selv om forholdet til hukommelse ikke er fullt ut forstått, lar dette fenomenet oss få en dypere forståelse av nervesystemet og åpner nye veier for å forbedre hukommelsen. Oppsummert er mestring av passende apoptose avgjørende for hukommelsens helse. Det kan sees at vi trenger å forbedre hukommelsen vår. Cistanche deserticola kan forbedre hukommelsen betydelig fordi Cistanche deserticola er et tradisjonelt kinesisk medisinsk materiale med mange unike effekter, en av dem er å forbedre hukommelsen. Effekten av kjøttdeig kommer fra de ulike aktive ingrediensene den inneholder, inkludert syre, polysakkarider, flavonoider osv. Disse ingrediensene kan fremme hjernens helse på ulike måter.

Klikk vet måter å forbedre hjernefunksjonen på

Resultatene viste at lærings- og minneytelsen til rotter ble redusert når de ble utsatt for HAH-miljøet. Den ble fulgt av jernakkumulering, dysfunksjonell jernmetabolisme, redusert BDNF og oppregulering av MDA og Caspase-3. TEM bekreftet de ultrastrukturelle endringene i nevroner og mitokondrier. EGCG reduserte HAH-indusert kognitiv svekkelse, jernavleiring, oksidativt stress og apoptose og fremmet nevronal regenerering mot kronisk HAH-mediert nevrale skade.

Nøkkelord
Stor høyde · Hypoksi · Kvantitativ følsomhetskartlegging · Jernakkumulering · Legemiddelintervensjon.

Introduksjon
Menneskelige aktiviteter i områder med stor høyde (mer enn 3000 m) har nylig økt betydelig [1]. Blant de 140 millioner menneskene verden over som bor permanent i store høyder [2, 3] og andre for turisme eller forsvar av grenser, er 5–10 % i fare for å utvikle kronisk fjellsyke som er preget av overdreven erytrocytose og alvorlig hypoksemi [4, 5] . Hjernen, som et av de mest oksygenforbrukende organene, er følsom for hypoksi [6]. I tillegg forstyrrer høyhøydehypoksi (HAH) alvorlig den strukturelle integriteten til de viktigste nevronene og mitokondriell morfologi i hippocampus [7]. Symptomene indusert av kronisk eksponering for et HAH-miljø inkluderer hodepine, svimmelhet, søvnforstyrrelser, tretthet og mangel på mental konsentrasjon [5, 8, 9]. Videre kan HAH også utløse nevrokognitive dysfunksjoner som romlig læring, hukommelse og humør [10]. Behandlingen av HAH-indusert nevrale skade har dermed blitt et fokus for oppmerksomhet innen høyhøydemedisin [11, 12].

Det er av stor betydning å finne egnede formuleringer for forebygging av HAH-indusert hjerneskade. Grønne teblader inneholder (−)-epigallocatechin-3-gallat (EGCG) (50–60 %), (−)-epigallocatechin (EGC) (15–20 %), (−)-epicatechin-3- gallat (EKG) (10–15 %) og (−)-epicatechin (EC) (5–10 %) [13, 14]. EGCG, som angivelig er mer rikelig i grønne teblader (7,1 g per 100 g) enn i oolong-te (3,4 g per 100 g) og svarte teblader (1,1 g per 100 g) [15], har en potent antioksidantegenskap pga. til de åtte hydroksylgruppene og to trifenolgruppene i sin grunnleggende struktur [16, 17]. I tillegg har det vist seg å kunne krysse blod-hjerne-barrieren og nå hjerneparenkymet i dyrestudier [18, 19]. Det har vært noen rapporter om de nevrobeskyttende mekanismene til EGCG som metallkeleringsegenskaper, undertrykkelse av oksidativt stress, betennelse, apoptose og akselerasjon av nerveregenerering [20–22]. Zhang et al. gjennomgikk effekten av EGCG på mange sykdommer og påpekte at EGCG beskyttet nevronceller ved å indusere autofagi. De oppsummerte også at de antiinflammatoriske og antioksidantegenskaper til EGCG var avgjørende for dens beskyttende rolle ved sykdommer i sentralnervesystemet [23].

Imidlertid har få studier rapportert den nevrobeskyttende effekten av EGCG mot kronisk HAH-mediert nevrale skade. For å fylle dette gapet etablerte vi i denne studien en rottemodell for kronisk eksponering for et naturlig HAH-miljø i et forsøk på å verifisere den potensielle behandlingsmekanismen til EGCG. Videre brukte vi kvantitativ følsomhetskartlegging (QSM), ved gradient-ekko MR ved 7 T, som kan overvinne den ikke-lokale effekten av magnetfeltet og gi en kontrastmekanisme for vev in vivo, for å kvantifisere hjernens jerninnhold [24].
Materialer og metoder

Dyr

Totalt 120 Sprague-Dawley hannrotter som veide 130–150 g ble hentet fra Chengdu Dashuo Laboratory Animal Co., Ltd. De ble holdt i et dyrehus ved 18–22 grader i en 12 timers lys/mørke syklus med mat og vann gitt ad libitum. Alle prosedyrer utført på dyr ble godkjent av Animal Care and Use Committee ved West China Hospital.

Studere design

Rotter ble randomisert og delt inn i fire grupper. Rotter i hypoksigruppen og h-EGCG-gruppen ble fôret og holdt i Yushu, Kina i en høyde av 4500 m. Rotter i normalhøydegruppen (n-gruppen) og n-EGCG-gruppen ble matet i Chengdu, Kina i en høyde av 500 m. Disse rottene ble gitt et normalt fôr i én måned, etterfulgt av forskjellige behandlinger. (1) Hypoksigruppe: rotter ble injisert intraperitonealt hver dag med fysiologisk saltvann (0,9%) i en måned. (2) h-EGCG-gruppe: rotter ble intraperitonealt injisert hver dag med 50 mg/kg EGCG (renhet, 98 %; Cas, 989-51-5; Sigma-Aldrich; lagret ved 4 grader) i én måned. (3) n gruppe: rotter ble intraperitonealt injisert hver dag med fysiologisk saltvann (0,9%) i en måned. (4) n-EGCG-gruppe: rotter ble intraperitonealt injisert hver dag med 50 mg/kg EGCG i én måned.

EGCG (5 mg/ml) ble oppløst i vann i et forhold på 1:1. Volumet som ble injisert i rotter ble bestemt av vekten av rottene, som nådde en endelig injeksjonsmengde på 50 mg/kg. Etter den behandlingen ble noen rotter brukt til henholdsvis Morris vannlabyrintanalyse (n=10 for hver gruppe) og hjerne-MR-analyse (n=10 for hver gruppe. Noen andre rotter ble ofret og hjernevev ble samlet for DAB-forbedret Perls-farging (n=3 for hver gruppe), for Western blotting, biokjemiske vurderinger og qPCR-analyser (n=6 for hver gruppe) , og transmisjonselektronmikroskopanalyse (n=1 for hver gruppe).

Atferdseksperiment

Morris vannlabyrint (MWM) ble utført som tidligere beskrevet for å analysere læringen og minnet til rotter [25], det ble utført på samme sted der rottene ble holdt. MWM besto av et rundt stålbasseng (160 cm i diameter, 60 cm i høyden og 31 cm i dybden) fylt med vann til et nivå på 1 cm over toppen av en plattform (10 cm i diameter og 30 cm i dybden) ). Vanntemperaturen ble holdt på 22±2 grader og ugjennomsiktig med strålende svart blekk. Plattformen ble festet i en av de fire kvadrantene som ble satt opp under treningen i fire påfølgende dager. Rettssaken ble avsluttet når rottene nådde plattformen. Rømningsforsinkelsen ble registrert. Hvis rottene ikke klarte å nå plattformen innen 60 s, ble de deretter manuelt guidet til plattformen og fikk være på den i 15 sekunder. På den femte dagen, etter at plattformen ble fjernet, gikk rottene inn i kvadranten som var motsatt av den opprinnelige plattformen. Deretter ble antall plattformoverganger og bevegelsesveier registrert innen 60 sekunder.

MR-protokoll

QSM ble evaluert ved MR, som er rapportert i en tidligere studie [26]. MR ble utført på en 7 Tesla skanner (BioSpec 70/30, Bruker, Tyskland). En tredimensjonal (3D) multi-ekko gradient-gjenkallet ekko (GRE) sekvens ble brukt for QSM. De eksperimentelle parameterne ble satt som følger: repetisjonstid (TR)=60 ms, flip-vinkel=15 grad, skivetykkelse=23 mm, innsamlingsmatrisestørrelse=256×256, felt av visning (FOV)=32 mm×32 mm, ekkotid for første ekko (TE1)=5 ms, ekkoavstand (ΔTE)=5.77 ms, antall ekko{{19 }} og båndbredde=50 kHz. Både størrelses- og fasebilder ble lagret for QSM-rekonstruksjon. Det var tre trinn i QSM-kartleggingsalgoritmene utført med MATLAB R2014a (The Math Works, Natick, MA), pakke ut den innpakkede fasen, fjerne bakgrunnsfeltet og generere følsomhetskart fra vevsfeltet.

Vevsforberedelse

Rottene i hver gruppe ble intraperitonealt administrert 10 % kloralhydrat for dyp anestesi (1,5 mg/kg) og deretter transkardialt perfusert med iskald saltvann (ca. 30 minutter) av en peristaltisk pumpe (BT100-2 J, LongerPump, Shanghai, Kina). For DAB-forbedret Perls-farging ble hjernen dissekert og etterfiksert i 2,5 % paraformaldehyd over natten ved 4 grader. Dagen etter ble koronale seksjoner tatt fra hippocampus for farging. For andre bestemmelser bortsett fra immunhistokjemi, ble hippocampus strippet raskt på is og lagret ved 80 grader.

DAB Enhanced Perls' Staining

DAB-forbedret Perls-farging ble brukt for å oppdage cellulær jernakkumulering [27]. Seksjoner av hjernevev ble nedsenket i destillert vann i 3 minutter og deretter inkubert med nylaget Perls-løsning (2 % kaliumferrocyanid/2 % saltsyre) i 3 0 minutter, etterfulgt av fosfatbufret saltvann (PBS) vasker. Endogen peroksidaseaktivitet ble blokkert med 0,3 % hydrogenperoksidløsning i metanol i 15 minutter, etterfulgt av 3 vaskinger i PBS. Signaler ble utviklet ved inkubering i 3 minutter i 3,3-diaminobenzidin (DAB) og hematoksylin (Sigma-Aldrich) ble brukt til motfarging.

Biokjemiske vurderinger

Hippocampus ble isolert og omrørt jevnt for å oppnå et 10 % homogenat som deretter ble sentrifugert ved 30,000–40,000 RPM i 10 minutter for å oppnå en supernatant for å estimere hippocampusjernet ved hjelp av et kolorimetrisk sett (E-BCK139S, Elabscience, Wuhan, Kina), og malondialdehyd (MDA) ble påvist i supernatanten ved å bruke et ELISA-sett (Elabscience, Wuhan, Kina).

Western Blotting

Proteinkonsentrasjonen ble bestemt ved å bruke et bicinchoninsyre-analysesett (BCA, Biosharp, Beijing, Kina). Proteinene ble separert med 12% SDS-PAGE og deretter overført til polyvinylidenfluorid (PVDF) membraner. De sistnevnte ble blokkert i 2 timer ved romtemperatur i 5 % skummetmelkpulver fortynnet med buffer og deretter inkubert med primære antistoffer over natten ved 4 grader, inkludert kanin-anti-spaltet caspase-3 (1:1000 , Affinity Biosciences, Jiangsu, Kina), kanin anti-hjerne-avledet nevrotrofisk faktor (BDNF) (1:1000, Affinity Biosciences, Jiangsu, Kina) og kanin anti-Actin (1:5000, Affinity Biosciences, Jiangsu, Kina). Neste dag ble membranene vasket tre ganger med TBST i 5 minutter hver gang, og deretter inkubert med en HRP-merket geit anti-kanin sekundær antistoffløsning (1:10 000, Servicebio, Wuhan, Kina) i 1 time og vasket tre ganger i 5 min.

Kvantitativ sanntids PCR

Animal Total RNA Isolation Kit (Foregene), 5×All-In-One MasterMix (med AccuRT Genomic DNA Removal kit) (abm), og EvaGreen Express2×qPCR MasterMix-No Dye (abm) ble brukt etter instruksjonene fra produsentene. De spesifikke primerparene var som følger: Fpn, foroverprimer, 5'-CACCACAGGATATGCTTACAC TCAGG-3'; revers primer, 5'-GAGAACAGACCAGTC CGAACAAGG-3'; b-aktin, forward primer, 5'-TGTCAC CAACTGGGACGATA-3'; revers primer: 5ʹ-GGGGTG TTGAAGGTCTCAAA-3ʹ. Fpn-mRNA-nivået for hver prøve ble normalisert til det for b-aktin-mRNA.

Transmisjonselektronmikroskopi (TEM)

Hippocampiene ble etterfiksert i 2,5 % glutaraldehyd-elektronmikroskopstasjonær væske og deretter dehydrert i acetonløsninger ved økende konsentrasjoner og innebygd med Epox 812. Deretter ble seksjonene farget med uranylacetat og blycitrat. Ultrastrukturelle bilder i CA3-feltet i hippocampus ble deretter tatt med et transmisjonselektronmikroskop (TEM) med en JEM-1400-FLASH (JEOL, Tokyo, Japan).

Statistiske metoder

Data presenteres som gjennomsnittlig standardavvik (SD). Variabler som oppfylte de parametriske testbetingelsene ble evaluert ved å bruke Welchs t-test, enveis eller toveis gjentatt variansmåling (ANOVA), etterfulgt av Tukeys multiple sammenligningstest. De variablene som ikke oppfylte de parametriske testbetingelsene ble evaluert ved å bruke Mann–Whitney U-testen, Kruskal–Wallis-testen eller Welch og Brown-Forsythe ANOVA. En verdi av P<0.05 was considered statistically significant. Statistical analysis and figures were obtained by GraphPad Prism Version 9.0 (GraphPad Software, CA, USA).

Resultater

Effekt av EGCG på læring og hukommelse hos rotter utsatt for kronisk HAH

For å verifisere om EGCG har en effekt på romlig læring og minneytelse til rotter utsatt for kronisk HAH, ble MWM-testen utført. Som vist i fig. 1A, ble antallet plattformkryssinger av hypoksigruppen betydelig redusert (P< 0.001, vs. the n group). The treatment of EGCG did not affect the number of crossings of rats in either the normal altitude group (n group vs. n-EGCG group, P>{{0}}.05) eller HAH-gruppen (hypoksigruppe vs. h-EGCG-gruppe, P > 0,05). Deretter ble rømningslatensen beregnet som tiden det tok for rotten å nå den skjulte plattformen (fig. 1B). Resultatene viste at på den andre til den fjerde dagen med trening, ble rømningslatensen for rotter i hypoksigruppen økt betydelig (alle P-verdier<0.01, vs. the n group). Moreover, the h-EGCG group showed reduced escape latency than that in the hypoxia group (all P values<0.05). Also, the swimming speed and distance in MWM were measured. No significant difference was found among these four groups at different time points (All P values>0.05, Fig. 1C). Deretter fant vi at svømmehastigheten til rotter i hypoksigruppen reduserte sammenlignet med n-gruppen på den andre dagen og den tredje dagen (alle P-verdier<0.01, Fig. 1D). Also, the swimming speed of rats in h-EGCG group was higher than that in hypoxia group (all P values<0.05, Fig. 1D).

DAB Enhanced Perls' Staining

Etter 8 uker med kronisk HAH-eksponering økte jern betydelig i CA1- og CA3-områdene i hippocampus i hjernen sammenlignet med n-gruppen (alle P-verdier)<0.01). After EGCG intervention, iron accumulation in CA3 and CA1 of the hippocampus was reduced compared to that of the hypoxia group (P<0.0001, P<0.001, respectively; Fig. 2).

Magnetiske følsomhetsendringer i hippocampale regioner

Sensibilitetsverdiene i hippocampus økte betydelig etter HAH-eksponering sammenlignet med n-gruppen (P<0.0001, Fig. 3A). After EGCG intervention, the values decreased compared to those of the hypoxia group (P<0. 0001, Fig. 3A).

Effekter av EGCG på Hippocampus oksidativt stress, jern og Fpn
Sammenlignet med n-gruppen, var MDA- og jerninnholdet i hypoksigruppen forhøyet (P<0.05, Fig. 3B, C). EGCG treatment reduced the levels of MDA and iron, indicating that alleviation of oxidative stress may facilitate EGCG to play a protective role in chronic HAH-induced brain injury in rats. To understand the mechanisms by which brain iron contents were changed by HAH, we further examined the mRNA expression of hippocampal Fpn and found that the Fpn decreased in the hypoxia group and increased in the h-EGCG group (P < 0.01, P < 0.05, respectively, Fig. 3D).

Western Blotting-resultater

Vi vurderte effekten av EGCG på Caspase{{0}}- og BDNF-nivåene. Western blotting (WB)-analyse viste høyere ekspresjon av Caspase-3 og lavere ekspresjon av BDNF i hippocampus til hypoksigruppen enn i n-gruppen (alle P-verdier < 0,0001, fig. 4). Dessuten reduserte EGCG-behandling nivåene av Caspase-3 og økte nivåene av BDNF (alle P-verdier<0.0001, Fig. 4).

Neurale ultrastrukturelle endringer

Etter 2 måneder med kronisk HAH-eksponering ble mitokondrier i hippocampus CA3 i hypoksigruppen hovne på grunn av reduksjon eller brudd på ryggen. Dessuten viste rottene i hypoksigruppen kondensert kjernefysisk kromatin, kjernekrymping, en høy grad av endoplasmatisk retikulumhevelse, økte lysosomer og økt elektrontetthet. Etter behandling med EGCG var mitokondriell hevelse, mitokondriell krystalloppløsning og elektrontetthet markant redusert sammenlignet med de i hypoksigruppen (fig. 5).

Diskusjon

I denne studien fant vi at behandling med EGCG betydelig forbedret læring, hukommelse og romlige utforskningsevner til hypoksigrupperottene og dempet den hippocampale nevrale skaden indusert av kronisk eksponering for HAH-miljøet. Dessuten fant vi også at til tross for betydelige forbedringer i alle indikatorene etter EGCG-behandling, returnerte disse indikatorene sjelden til normale hypoksinivåer.

Tidligere studier har funnet at EGCG har noen effekter på ulike typer lærings- og hukommelsessviktmodeller [28, 29]. Safar et al. fant at EGCG kan forbedre hukommelsen til morfinbehandlede rotter [30]. I samsvar med resultatene deres, i vår studie, etter daglig intervensjon med 50 mg/kg EGCG hos rotter som var kronisk eksponert for HAH, ble forsøkspersonenes lærings-, hukommelses- og romlige utforskningsevner forbedret, noe som tyder på at EGCG kan forbedre lærings- og hukommelsessvikt ved store høyder.

Mange studier har vist at overproduksjon av jern i hjernen har en nevrotoksisk effekt da det bidrar til oksidativ skade [31]. I denne studien ble jernakkumulering oppdaget ved MR, immunhistokjemifarging og biokjemiske vurderinger. I tillegg ble FPN, som det eneste kjente multitransmembrane jerneksportproteinet i pattedyrceller, vurdert med PCR. Sensibilitetsverdiene, positive celler av DAB forbedret Perls' farging og hippocampus-jerninnholdet økte i hypoksigruppen og reduserte i h-EGCG-gruppen mens FPN-uttrykk viste motsatt trend. Derfor konkluderte vi med at HAH-indusert jernakkumulering kan skje gjennom hemming av jernutstrømning via en reduksjon i FPN-uttrykk.

MDA er sluttproduktet av lipidperoksidasjon [32, 33], og kan brukes som en indikator på peroksidasjon. Tidligere studier har vist at oksidativt stress kan øke med økende høyde [34]. Vår studie avslørte også at MDA-konsentrasjoner økte betydelig i store høyder. I tillegg analyserte vi uttrykket av Caspase-3 og BDNF. Caspase-3 er den viktigste initiatoren og utøveren av terminale spaltningsenzymer og apoptose [35], mens BDNF, som et nevrotrofin, som kan regulere nevronoverlevelse og differensiering samt forbedre synaptisk overføring [36], fremmer regenerering. Lin et al. rapporterte at hypoksi kan øke nivåene av Caspase-3 og indusere apoptose i hippocampale nevroner [37]. Lee et al. rapporterte at etter 3 minutter med global iskemi i ørkenrotten, forhindret EGCG iskemi-indusert hippocampus celledød [38]. I vår studie fant vi også at EGCG reduserte nivåene av det proapoptotiske proteinet, Caspase-3, og økte uttrykket av BDNF.

Mitokondriell strukturell skade og dysfunksjon er viktige patologiske trekk i hjernen under hypoksi [39]. I vår studie oppdaget ultrastrukturell observasjon tilstedeværelsen av dyp farging, mitokondriell hevelse og crista-forsvinning i hippocampale nevroner under HAH, mens hippocampale nevroner etter EGCG-behandling ble betydelig beskyttet mot disse skadene som karyopyknose. Iwona Zwolak oppsummerte at EGCG kan beskytte mot tungmetalltoksisitet ved å bevare mitokondriell membranpotensial og forbedre mitokondrielle antioksidanter og respirasjonsfunksjoner [40]. Vi mistenker at disse mekanismene også kan være til stede i den beskyttende rollen til EGCG på hjerneeksponering for HAH-miljøet. Som konklusjon kan EGCG redusere jernakkumulering, senke oksidativt stressnivå og apoptose, og fremme nevronal regenerering, og dermed lindre svekkelse av rottehjerne indusert av kronisk eksponering for hypoksi i høye høyder. Derfor har det potensialet til å tjene som et nytt medikament for å behandle og forebygge kronisk fjellsyke.

Anerkjennelser

Vi vil gjerne uttrykke vår oppriktige takknemlighet til kjernefasilitetene til West China Hospital, Sichuan University, Chengdu, Kina, for å ha gitt oss fasilitetene og assistanse som åpen felttest og Morris vannlabyrinttest brukt i denne studien.

Forfatterbidrag

CC og HC unnfanget, designet også og utførte denne studien; CC behandlet dataene og utarbeidet manuskriptet; JC modifiserte manuskriptet; BL, BH, YW, DZ og YQ hjalp til med å utføre eksperimentene og FG var ansvarlig for alle prosessene.

Finansiering

Denne studien ble støttet av National Natural Science Foundation of China (nr. 81930046, 81771800 og 81829003).

Datatilgjengelighet

Datasettene generert under og/eller analysert i løpet av den nåværende studien er tilgjengelig fra den tilsvarende forfatteren på rimelig forespørsel.

Erklæringer

Interessekonflikt

Forfatterne har ingen relevante økonomiske eller ikke-finansielle interesser å offentliggjøre.

Etisk godkjenning

Denne studien ble utført i tråd med prinsippene i Helsinki-erklæringen. Godkjenning ble gitt av den eksperimentelle dyreetiske komiteen ved West China Hospital, Sichuan University, Chengdu, Kina.

Åpen tilgang

Denne artikkelen er lisensiert under en Creative Commons Attribution 4.0 internasjonal lisens, som tillater bruk, deling, tilpasning, distribusjon og reproduksjon i ethvert medium eller format, så lenge du gir passende kreditt til den(e) originale forfatteren(e) ) og kilden, oppgi en lenke til Creative Commons-lisensen, og angi om endringer ble gjort. Bildene eller annet tredjepartsmateriale i denne artikkelen er inkludert i artikkelens Creative Commons-lisens med mindre annet er angitt i en kredittgrense til materialet. Hvis materiale ikke er inkludert i artikkelens Creative Commons-lisens og din tiltenkte bruk ikke er tillatt av lovbestemt regulering eller overskrider tillatt bruk, må du innhente tillatelse direkte fra opphavsrettsinnehaveren.

Referanser

1. Jain V (2016) Hjernemat i stor høyde. Adv Neurobiol 12:307–321. https://doi.org/10.1007/978-3-319-28383-8_16

2. Singh LC (2017) Høyhøyde dermatologi. Indian J Dermatol 62:59–65. https://doi.org/10.4103/0019-5154.198050

3. Shi J, Wang J, Zhang J, Li X, Tian X, Wang W, Wang P, Li M (2020) Polysakkarid utvunnet fra Potentilla anserina L forbedrer akutt hypobarisk hypoksi-indusert hjernesvikt hos rotter. Phytother Res 34:2397–2407. https://doi.org/10.1002/ptr.6691

4. Leon-Velarde F, Maggiorini M, Reeves JT, Aldashev A, Asmus I, Bernardi L, Ge RL, Hackett P, Kobayashi T, Moore LG, Penaloza D, Richalet JP, Roach R, Wu T, Vargas E, Zubieta -Castillo G, Zubieta-Calleja G (2005) Konsensuserklæring om kroniske og subakutte høyhøydesykdommer. High Alt Med Biol 6:147–157.https://doi.org/10.1089/ham.2005.6.147

5. Villafuerte FC, Corante N (2016) Kronisk fjellsyke: kliniske aspekter, etiologi, ledelse og behandling. Høy Alt Med Biol 17:61–69. https://doi.org/10.1089/ham.2016.0031

6. Germuska M, Chandler HL, Stickland RC, Foster C, Fasano F, Okell TW, Steventon J, Tomassini V, Murphy K, Wise RG (2019) Dobbeltkalibrert fMRI-måling av den absolutte cerebrale metabolske hastigheten av oksygenforbruk og effektiv oksygen diffusivitet. Neuroimage 184:717–728. https://doi.org/10.1016/j.neuroimage.2018. 09.035

7. Maiti P, Singh SB, Mallick B, Muthuraju S, Ilavazhagan G (2008) Minneforringelse i stor høyde skyldes nevronal apoptose i hippocampus, cortex og striatum. J Chem Neuroanat 36:227– 238. https://doi.org/10.1016/j.jchemneu.2008.07.003

8. Turner CE, Barker-Collo SL, Connell CJ, Gant N (2015) Akutt hypoksisk gasspusting svekker kognisjon og oppgavelæring alvorlig hos mennesker. Physiol Behav 142:104–110. https://doi.org/10. 1016/j.physbeh.2015.02.006

9. McMorris T, Hale BJ, Barwood M, Costello J, Corbett J (2017) Effekt av akutt hypoksi på kognisjon: en systematisk oversikt og meta-regresjonsanalyse. Neurosci Biobehav Rev 74:225–232.https://doi.org/10.1016/j.neubiorev.2017.01.019

10. Wilson MH, Newman S, Imray CH (2009) De cerebrale effektene av oppstigning til store høyder. Lancet Neurol 8:175–191. https://doi. org/10.1016/S1474-4422(09)70014-6

11. Hu S, Shi J, Xiong W, Li W, Fang L, Feng H (2017) Oxiracetam eller fastigial kjernestimulering reduserer kognitiv skade i stor høyde. Brain Behav 7:e00762. https://doi.org/10.1002/brb3.762

12. Zhang XY, Zhang XJ, Xv J, Jia W, Pu XY, Wang HY, Liang H, Zhuoma L, Lu DX (2018) Crocin demper akutt hypobarisk hypoksi-indusert kognitiv underskudd hos rotter. Eur J Pharmacol 818:300–305. https://doi.org/10.1016/j.ejphar.2017.10.042

13. Graham HN (1992) Sammensetning av grønn te, forbruk og polyfenolkjemi. Forrige Med 21:334–350. https://doi.org/10. 1016/0091-7435(92)90041-f 14. Musial C, Kuban-Jankowska A, Gorska-Ponikowska M (2020) Gunstige egenskaper til katekiner av grønn te. Int J Mol Sci. https:// doi.org/10.3390/ijms21051744

15. Eng QY, Thanikachalam PV, Ramamurthy S (2018) Molekylær forståelse av Epigallocatechin gallate (EGCG) i kardiovaskulære og metabolske sykdommer. J Ethnopharmacol 210:296-310.

For more information:1950477648nn@gmail.com