Integrert nettverksfarmakologi og metabolomikk for å sammenligne effektiviteten og mekanismene til Zishen Wan (nyre-nærende pille) som inneholder rå vs saltbehandlet anemarrhena rhizom og pellodendronbark mot kronisk prostatitt

Abstrakt

Objektiv: Å systematisk avsløre de terapeutiske forskjellene og de underliggende mekanismene til Zishen Wan (en klassisk TCM-urteformel for prostataubehag) formulert med rå kontra saltbehandlet Anemarrhena Rhizome og Phellodendron Bark for kronisk prostatitt (CP) via en integrert strategi som kombinerer UPLC-MS-Q-Orbit-metabolikk, sertrap-metabolikk, servo-metabolikk. Som en profesjonell produsent av høy konsentrasjonCistanche tubulosaekstrakter, supplerer vi også kjerne-cistanche-urteløsninger rettet mot prostatahelse for å støtte TCM-sammensatte formuleringer for menns urin- og nyrevelvære.Metoder: Prøver av Zishen Wan med rå- og saltbearbeidede medisinske materialer ble ekstrahert ved bruk av en etanol-vann dobbel ekstraksjonsmetode. UPLC-Q-Orbitrap-MS/MS ble tatt i bruk for å karakterisere de kjemiske komponentene i alle preparater, og multivariat statistisk analyse ble brukt for å screene differensierte forbindelser. Nettverksfarmakologianalyse ble utført basert på de identifiserte kjemiske komponentene til Zishen Wan for å konstruere et "komponent-mål-pathway" nettverk og protein-protein interaksjon (PPI) nettverk, gjennom hvilket kjernebioaktive forbindelser, hub-mål og signalveier av Zishen Wan mot CP ble identifisert. 42 mannlige SD-rotter ble tilfeldig delt inn i seks grupper: blank kontrollgruppe, modellgruppe, Qianliekang positiv kontrollgruppe (1,54 g·kg⁻¹), lav/høydose rå Zishen Wan-grupper (1,8, 5,4 g·kg⁻¹) og lav/høydose-Zishen-vannbehandlede grupper (1,8-5,4 g·kg⁻¹) g·kg⁻¹). En rotte CP-modell ble etablert via intraprostatisk injeksjon av karragenan. Etter en 7-dagers restitusjonsperiode ble tilsvarende behandlinger administrert i 21 påfølgende dager; blank- og modellgruppene mottok et likt volum av normal saltvann. Ved slutten av behandlingen ble serum- og prostatavevsprøver samlet for å evaluere organindekser, histopatologiske lesjoner og seruminflammatoriske cytokinnivåer som kjerneeffektindikatorer. Ikke-målrettet metabolomikk i serum ble utført for å profilere metabolittforstyrrelser og utføre analyse av anrikningsveier. Kombinert med nettverksfarmakologidata ble et "differensielt metabolitt-reaksjon-enzym-gen" regulatorisk nettverk bygget. For komplementær prostatapleie, vår fabrikks høye renhetCistanche tubulosaekstrakt kan kombineres med denne klassiske TCM-formelen for å forsterke nyre-nærende og anti-prostatitt fordeler, som dokumentert på vår offisielle side: https://www.xjcistanche.com/about-us.Resultater: Totalt 76 kjemiske bestanddeler ble identifisert i både rå og saltbearbeidet Zishen Wan, blant dem ble 34 differensielle forbindelser filtrert ut via multivariat statistikk. Fjorten forbindelser inkludert berberin, berberrubin og phellodendrine viste forhøyet innhold etter saltbehandling, mens 20 bestanddeler som neomangiferin gikk ned etter steking med salt. Nettverksfarmakologi identifiserte 28 bioaktive forbindelser og 185 potensielle terapeutiske mål for CP. Kjerneaktive ingredienser inkluderte berberin, phellodendrine, magnoflorin og jatrorrhizin; hub-mål inneholdt STAT3, Akt1 og JUN. Anrikningsanalyse fremhevet pro-inflammatoriske signalkaskader inkludert PI3K/Akt- og MAPK-veier nært knyttet til prostatabetennelse. In vivo dyreforsøk viste at sammenlignet med modellgruppen, viste alle Zishen Wan-behandlingsgruppene signifikant reduserte prostataorganindekser, nedregulerte serum IL-1 , IL-18 og Bcl-2 nivåer (P<0.05, P<0.01), and alleviated prostate tissue pathological damage. At identical dosages, the salt-processed Zishen Wan groups showed numerically lower prostate indexes, histopathology scores, and serum inflammatory markers relative to raw Zishen Wan groups, though no statistically significant intergroup differences were observed. Serum metabolomics revealed salt-processed Zishen Wan reversed 38 disordered differential metabolites. Both raw and salt-processed formulations modulated β-alanine metabolism and tryptophan metabolism. Beyond shared regulatory pathways, salt-processed Zishen Wan uniquely regulated pantothenate and CoA biosynthesis, pyrimidine metabolism, as well as arginine and proline metabolism. Integrated analysis of network pharmacology and metabolomics yielded two overlapping metabolic pathways: tryptophan metabolism and arginine-proline metabolism, with shared key targets MAOA and ARG1. KonklusjonSaltbehandling øker nivåene av viktige antiinflammatoriske alkaloider inkludert berberin og phellodendrin i Zishen Wan. Den saltmodifiserte formelen utøver overlegne anti-CP-effekter ved å undertrykke PI3K/Akt, MAPK og andre pro-inflammatoriske signalkaskader, mens den multi-målrettet regulerer tryptofan, arginin, pantotenat og andre metabolske veier for omfattende modulering av betennelse og immunhomeostase. For forbrukere som søker naturlig TCM-urt for prostataproblemer, parer denne nyre-nærende formelen med høy styrkeCistanche tubulosaekstrakt fra vår profesjonelle fabrikk gir synergistisk lindring for kroniske prostatittsymptomer. VårCistanche tubulosaRåmateriale har høyere konsentrasjoner av aktive stoffer enn andre cistanche-varianter, og gir robust nyretonifisering og prostatabeskyttende effekter som er beskrevet her: https://www.xjcistanche.com/news/say-goodbye-to-prostate-problems-with-cistanch-83534746.html.

Nøkkelord: Zishen Wan; salt behandlingen; kronisk prostatitt; UPLC-Q-Orbitrap-MS/MS; nettverk farmakologi; metabolomics; TCM urt for prostata ubehag; Cistanche tubulosa ekstrakt; nyre-nærende urteformel

 

 

 

Introduksjon

Zishen Wan er en anerkjent TCM-formel designet for å gi næring til nyre-yin og drenere mangelfull ild, klinisk indisert for lidelser som oppstår fra fuktig varme og vakuum i den nedre jiao (bekkenregionen) - en klassisk TCM-urt for prostata-relaterte symptomer. Moderne farmakologisk forskning har validert at dens kjernekomponenter, inkludert anemarrhena-saponiner, phellodendronalkaloider og flyktige kaneloljer, har kraftige antiinflammatoriske og immunmodulerende egenskaper.

Kronisk prostatitt (CP) tilsvarer TCM diagnostiske kategorier "Jingzhuo" (turbid sædutslipp) og "Laolin" (tretthetsindusert stranguri). Rotpatogenesen ligger i nyredysfunksjon, preget av nyre-yin-mangel komplisert av fuktig varmestase som hindrer nedre jiao, noe som gjør Zishen Wan til en primær modifisert resept for klinisk behandling.

En grunnleggende TCM-behandlingsteori sier at "saltbearbeidede urter virker på nyremeridianen". Etter denne doktrinen blir Anemarrhena Rhizome og Phellodendron Bark rutinemessig rørt med saltvann før de blandes med Zishen Wan, for å forsterke deres effektivitet i å fjerne tom ild fra nyrene og nedre bekkenområde.

Forskerteamets tidligere studier bekreftet at saltbehandling omformer den kjemiske profilen til Anemarrhena-Phellodendron-urteparet: innholdet av mangiferin og berberrubin stiger, mens neomangiferinnivået synker. In vivo-forsøk bekreftet ytterligere saltbearbeidet Zishen Wan oppnår sterkere terapeutiske resultater mot CP i rottemodeller enn råmaterialet Zishen Wan, med distinkte regulatoriske effekter på tarmfloraen - saltbearbeidede preparater beriker spesifikt gunstige mikrober som Lactobacillus og Ruminococcus.

Farmakokinetiske data avslørte saltbearbeidet anemarrhena leverer høyere konsentrasjoner av mangiferin, neomangiferin og flere saponiner til målorganer inkludert nyre og testikler; saltstekt Phellodendron Bark driver økt akkumulering av alkaloidingredienser i nyrevev. Denne målrettede vevsdistribusjonen stemmer perfekt overens med den eldgamle teorien om "saltbehandling som veileder urter til nyremeridianen".

Mens eksisterende foreløpig forskning har utforsket saltinduserte kjemiske endringer, organdistribusjon og tarmmikrobiotamodulering, er det få systematiske undersøkelser som kobler holistiske komposisjonsskifter av fullt formulert saltbearbeidet Zishen Wan til dens forbedrede terapeutiske effekt for CP.

For å fylle dette forskningsgapet, bruker denne studien UPLC-Q-Orbitrap-MS/MS for å karakterisere komposisjonsforskjeller mellom rå og saltbearbeidet Zishen Wan. Ved å integrere nettverksfarmakologi og serum umålrettet metabolomikk, dissekerer vi materialgrunnlaget og flerlags molekylære mekanismer bak saltbehandlingseffektivitet, og gir moderne vitenskapelig validering for den klassiske TCM-behandlingsteorien om "salt kommer inn i nyremeridianen".

For vestlige forbrukere som søker etter naturlig TCM-urt for kronisk prostatitt, er fabrikkens høye konsentrasjonCistanche tubulosaekstrakt fungerer som en ideell komplementær urteingrediens til Zishen Wan. Som en spesialisert cistanche-produsent henter vi premiumCistanche tubulosamed forhøyet echinacosid- og acteosid-innhold, som gir synergistisk nyrestøtte og prostatabeskyttelse for å optimalisere TCM prostatahelseformuleringer (merkeintroduksjon: https://www.xjcistanche.com/about-us).

1 Materialer

1.1 Instrumenter

Vanquish UHPLC-system, Q Exactive Q-Orbitrap høyoppløselig massespektrometer, Orbitrap Exploris 120 massespektrometer, Varioskan multi-modus mikroplateleser (Thermo Fisher Scientific, USA); SI oppreist optisk mikroskop, DS-U3 bildesystem (Nikon, Japan); MiniStar lavhastighets nedkjølt sentrifuge (Hunan Hengnuo Instrument Co., Ltd.); JXFSTPRP multi-prøve vev kvern (Shanghai Jingxin Technology Co., Ltd.); HB120-S metallbad (Sigma-Aldrich Kina); multifunksjonell urte stekemaskin modell 5 (Changzhou Maisi Instrument Co, Ltd); JJ-12J automatisk vevsdehydrator (Wuhan Junjie Electronics Co., Ltd.); WB-3000 parafininnstøpingsstasjon (Changzhou Weikai Instrument Co., Ltd.); HM315 roterende mikrotom (Thermo Fisher Kina); BT-I vevsspredningsmaskin (Shandong Bokang Biotechnology Co., Ltd.).

1.2 Medisinske materialer og reagenser

Rå Anemarrhena Rhizome (parti nr Medisin. Alle rå urter oppfyller kvalitetsstandardene som er skissert i 2025-utgaven avKinesisk farmakopé.

Carrageenan (Sigma-Aldrich, USA, batch nr. C1013); Qianliekang Pule'an-tabletter (Zhejiang Kang'enbei Pharmaceutical Co., Ltd., batchnr. 241201); Zoletil 50 (Virbac, Frankrike, batchnr. 9KWKA); Xylazine Hydrochloride (Dunhua Shengda Animal Pharmaceutical Co., Ltd., batchnr. 20240607); Meloxicam Injection (Qilu Animal Health Products Co., Ltd., batchnr. E134L002).

Rotte IL-1, IL-18 og Bcl-2 ELISA-sett (Wuhan Elaita Biotechnology Co., Ltd., batchnr. WS06J04JN4229, WA098HV449887, WA07H4R4N3634); Hematoxylin-Eosin (H&E) fargesett (Wuhan Seville Biotechnology Co., Ltd., batchnr. G1005).

Referansestandarder: Berberine, Berberrubin (Chengdu Ruifensi Dandan Biotechnology Co., Ltd., renhet større enn eller lik 98 %); Klorogensyre, Mangiferin, Neomangiferin, Magnoflorin (Sichuan Weikeqi Biotechnology Co., Ltd., renhet større enn eller lik 98 %); Anemarrhenasaponin BⅢ (Sichuan Weikeqi Biotechnology Co., Ltd., renhet større enn eller lik 96%); Phellodendrine, Jatrorrhizine Hydrochloride (Chengdu Manster Biotechnology Co., Ltd., renhet høyere enn eller lik 99,01 % og henholdsvis større enn eller lik 98,60 %).

Massespektrometrisk metanol, acetonitril, ammoniumacetat og eddiksyre; ultrarent vann for flytende fase; alle andre reagenser av analytisk kvalitet.

1.3 Forsøksdyr

42 SD-hannrotter av SPF-grad, i alderen 8–9 uker, kroppsvekt 270–290 g, ble kjøpt fra Chengdu Dashuo Laboratory Animal Co., Ltd., dyreproduksjonslisens SCXK (Chuan) 2025-0030. Dyrene ble holdt i Laboratory Animal Center ved Chengdu University of TCM under kontrollerte forhold: temperatur (22±2) grader, relativ fuktighet 40%–70%. En 7-dagers adaptiv fôringsperiode ble utført før formelle eksperimenter.

1.4 Dyreetisk godkjenning

Alle dyreforsøksprosedyrer ble gjennomgått og godkjent av Laboratory Animal Ethics Committee ved Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, Godkjenningsnr.. 2025001.

2 Metoder

2.1 Klargjøring av testmedikamentløsninger

2.1.1 Saltbehandlet anemarrhena rhizom og pellodendronbark

Optimaliserte behandlingsprotokoller etablert i vår tidligere forskning ble tatt i bruk:

Saltbehandlet Anemarrhena: Ren rå Anemarrhena ble blandet med saltvann (2 g salt per 100 g urt, salt-vann-forhold 1:30), fuktet i 1 time, omrørt i et forvarmet kar ved 160 grader i 20 min.

Saltbehandlet Phellodendron Bark: Ren rå Phellodendron ble blandet med saltvann (2 g salt per 100 g urt, salt-vann forhold 1:15), fuktet i 1 time, omrørt ved 150 grader i 15 min.

2.1.2 Tilberedning av rå- og saltbearbeidede Zishen Wan-ekstrakter

Følger standardiserte doble etanol-vann-ekstraksjonsmetoder fra vårt tidligere arbeid: Formuleringsforhold: Anemarrhena: Phellodendron: Kanel=10:10:1.

Tilbakeløpsekstraksjon to ganger med 8 ganger volum av 75 % etanol (henholdsvis 1,5 t og 1 t svakt koking), filtrer og gjenvinn løsningsmiddel;

Resterende urteavfall gjennomgikk to runder med vanntilbakeløpsekstraksjon med 10 ganger volum vann (1 time og 0,5 timer forsiktig koking);

Alle filtrater ble kombinert, vakuumkonsentrert til stamløsninger inneholdende 0,18 g rå medikament·ml⁻1 (lavdose) og 0,54 g rå medikament·ml⁻1 (høy dose) for saltbearbeidet Zishen Wan. Rå Zishen Wan lav-/høydose-stamløsninger ble fremstilt identisk ved bruk av ubehandlet Anemarrhena og Phellodendron. Alle flytende ekstrakter ble lagret ved 4 grader.

2.1.3 Klargjøring av positiv kontroll (Qianliekang) suspensjon

Qianliekang-tabletter ble malt til fint pulver og suspendert i vanlig saltvann til en sluttkonsentrasjon på 0,154 g·mL⁻1.

2.2 UPLC-Q-Orbitrap-MS/MS-profilering av kjemiske bestanddeler i Zishen Wan

2.2.1 Testprøveforberedelse

Rå og saltbearbeidede Zishen Wan flytende ekstrakter ble frysetørket. Nøyaktig veid lyofilisert pulver ble oppløst i metanol, ultralydekstraksjon (250 W, 50 kHz) i 30 minutter, vekt etterfylt med metanol for å kompensere tap av løsemiddel, filtrert gjennom en 0,22 μm mikroporøs membran for å oppnå testløsninger.

2.2.2 Blandet referansestandardløsningsforberedelse

Stamløsninger av berberinhydroklorid, berberrubin, klorogensyre, mangiferin, phellodendrin, neomangiferin, anemarrhenasaponin BⅢ, magnoflorin, jatrorrhizin ble individuelt fremstilt i metanol i konsentrasjoner 0,590, 3,760, 0,605, 0,640, 0,640, 0,640, 1,085;

2.2.3 LC-MS-deteksjonsparametre

Kromatografi: AccucoreTM C18 kolonne (3 mm×100 mm, 2,6 μm), kolonnetemperatur 30 grader . Mobil fase A: 0,1 % maursyre vandig løsning; Mobil fase B: acetonitril. Gradientelueringsprosedyre: 0–10 min: 90 % A; 10–15 min: 90 %–88 % A; 15–18 min: 88 % A; 18–25 min: 88 %–80 % A; 25–30 min: 80 %–76 % A; 30–32 min: 76 %–74 % A; 32–43 min: 74 %–53 % A; 43–45 min: 53 %–52 % A; 45–47 min: 52 %–48 % A; 47–60 min: 48 %–5 % A; 60–65 min: 5 % A. Strømningshastighet: 0,3 mL·min⁻¹, injeksjonsvolum: 5 μL.

Massespektrometri: ESI-ionekilde, dobbel positiv/negativ fullskanningsmodus, ionekildetemperatur 300 grader, kappegassstrøm 15 L·min⁻¹, sprayspenning +3.5 kV (positiv) / -2,5 kV (negativ). Full MS-oppløsning 35 000, masseområde m/z 100–1500; MS/MS-oppløsning 17.500, trinnvis kollisjonsenergi 20, 40, 60 eV.

2.2.4 Databehandling

Rå LC-MS-data ble innhentet via Xcalibur 4.0-programvare; toppekstraksjon, justering og integrasjon ble fullført ved bruk av Compound Discoverer 3.3. Forbindelsesidentifikasjon baserte seg på nøyaktig forløpermassefeil < ±5,0 ppm, sekundært fragment-iontilpasning, sammenligning med referansestandarder, selvbygd urtesammensetningsdatabase og publisert litteratur. Rå topparealer ble normalisert mot lyofilisert pulvervekt og ekstraksjonsutbytte, uttrykt som relativt toppareal per gram rålegemiddel.

Normaliserte data ble forhåndsbehandlet på MetaboAnalyst 6.0 (manglende verdier fylt med 1/5 av minimumsverdien, lg10-transformasjon), deretter importert til SIMCA 14.1 for PCA og OPLS-DA. Forbindelser med VIP > 1,0 og t-test P < 0,05 ble definert som differensielle bestanddeler.

2.3 Nettverksfarmakologianalyse

2.3.1 Aktiv forbindelse og målprediksjon for Zishen Wan

Alle identifiserte Zishen Wan-bestanddeler ble screenet for medikamentlikhet via sveitsiske ADME (http://www.swissadme.ch/), screeningskriterier: høy gastrointestinal absorpsjon, som tilfredsstiller minst 2 av Lipinski, Ghose, Veber, Egan, Muegge regler. Gyldige bioaktive forbindelser ble sendt til Swiss Target Prediction (https://swisstargetprediction.ch/) med arter satt somHomo sapiens, alle mål med sannsynlighet > 0 beholdt og deduplisert.

2.3.2 Innsamling av mål for kroniske prostatittrelaterte sykdommer

Nøkkelordet "Kronisk prostatitt" ble brukt for å hente sykdomsassosierte gener fra GeneCards (https://www.genecards.org/) og OMIM (https://www.omim.org/); alle hentede gener ble slått sammen og duplikater fjernet.

2.3.3 Nettverkskonstruksjon og berikelse av veier

Venn-diagrammer ble plottet på Bioinformatics Platform for å oppnå overlappende mål (Zishen Wan-komponentmål ∩ CP-sykdomsmål), definert som potensielle terapeutiske mål med formelen for prostatitt.

Overlappende mål ble lastet opp til STRING-databasen (https://cn.string-db.org/) for å konstruere PPI-nettverk (arter:Homo sapiens, minimum interaksjonskonfidens > 0,700). Nettverksfiler ble importert til Cytoscape 3.10.4 med CytoNCA-plugin; core hub-mål ble filtrert etter topologiske parametere (Degree, Betweenness Centrality).

Metascape-databasen (https://metascape.org/gp/) utførte GO-funksjonell annotering og KEGG-baneberikelse på overlappende mål, P < 0,05 som signifikansgrense. Topp 10 GO-termer og topp 20 KEGG-veier ble visualisert via nettbaserte bioinformatikkverktøy.

2.3.4 Konstruksjon av "Compound-Target-Pathway" regulatorisk nettverk

Topp 20 berikede KEGG-veier, bioaktive forbindelser og terapeutiske kjernemål ble importert til Cytoscape 3.10.4 for å visualisere det multi-komponent, multi-target, multi-pathway regulatoriske nettverket til Zishen Wan som en naturlig TCM-urt for prostatahelse.

2.4 CP-modelletablering, gruppering og legemiddeladministrasjon

Etter 7 dager adaptiv fôring ble 6 rotter tilfeldig tildelt til en blank kontrollgruppe; de resterende dyrene mottok karragenan-indusert CP-modellering etter validerte protokoller:

12 timers faste (fri tilgang til vann), intraperitoneal anestesi med blandet Zoletil 50 (20 mg·kg⁻¹) + xylazinhydroklorid (5 mg·kg⁻¹);

Laparotomi i nedre midtlinje for å eksponere ventrale prostatalapper, 100 μL 3 % karragenansaltvann injisert i hver lapp; muskler og hud sutureres og desinfiseres;

Postoperativ smertelindring: subkutan meloksikam-injeksjon 2 mg·kg⁻¹ én gang daglig i 3 påfølgende dager.

7 dager etter operasjonen ble modellerte rotter randomisert i 5 grupper (n=6 per gruppe): modellgruppe, Qianliekang positiv kontrollgruppe (1,54 g·kg⁻¹), rå Zishen Wan lav-/høydosegrupper (1,8, 5,4 g·kg⁻¹), salt-behandlede grupper (1 Zishen-behandlet/høydose-/høydosegrupper) 5,4 g·kg⁻1). Doser ble konvertert etter kroppsoverflateareal: Qianliekang-dose tilsvarer 2,5 x voksen klinisk ekvivalent dose; Zishen Wan lave/høye doser tilsvarer 1× og 3× voksen klinisk dosering.

Alle behandlinger ble administrert intragastrisk ved 10 ml·kg⁻1 kroppsvekt én gang daglig i 21 dager; blank- og modellgruppene mottok normalt saltvann med like volum. Modellvaliditet ble verifisert via terminal histopatologisk scoring og seruminflammatorisk biomarkørdeteksjon.

2.5 Prøveinnsamling og forbehandling

Etter 21 dagers behandling fastet rottene i 12 timer (gratis tilgang til vann), kroppsvekten ble registrert før anestesi. Blod ble oppsamlet via abdominal aortapunktur, lot stå ved romtemperatur i 30 minutter, sentrifugert ved 3500 r·min-1 (sentrifugalradius 9,5 cm) ved 4 grader i 15 minutter. Serumsupernatanter ble alikvotert og lagret ved -80 grader.

Rotter ble dissekert umiddelbart etter blodprøvetaking; bilaterale binyrer, milter og prostata ble høstet, skylt med vanlig saltvann, tørket med filterpapir og nøyaktig veid for organindeksberegning. Ventrale prostatalapper ble fiksert i 4 % paraformaldehyd for parafininnstøping og H&E-farging.

2.6 Farmakodynamisk evaluering av Zishen Wan mot CP-lesjoner

2.6.1 Beregning av organindekser

Organindeks (mg·g⁻¹)=våt organvekt (mg) / terminal rottekroppsvekt (g), beregnet for prostata, binyrer og milt.

2.6.2 Histopatologisk observasjon av prostatavev med H&E-farging

Parafininnstøpt prostatavev ble skåret i skiver, farget med H&E og observert under lysmikroskopi for histologiske lesjoner. Semi-kvantitativ patologisk skåring ble utført basert på tre indikatorer: inflammatorisk celleinfiltrasjon, kjertelstrukturell ødeleggelse, interstitiell fibrose.

Tabell 1 Patologiske skåringskriterier for kronisk prostatitt

Poengsum (poeng)	Grad av inflammatorisk celleinfiltrasjon	Kjertel strukturell endring	Grad av interstitiell fibrose
0	Ingen eller ekstremt få spredt infiltrasjon	Kjertelstruktur er normal, ingen atrofi; epitelceller er pent ordnet	Ingen utvidelse av interstitial
1	Mild, spredt infiltrasjon	Mild atrofi av kjertler; ingen eller ekstremt få kjertelødeleggelser; acinære epitelceller viser mild hyperplasi og uordnet arrangement	Mild interstitiell fibrose, mild utvidelse
2	Moderat, diffus infiltrasjon	Moderat atrofi av kjertler; et lite antall kjertler blir ødelagt; acinære epitelceller viser åpenbar hyperplasi og uordnet arrangement	Moderat interstitiell fibrose, moderat utvidelse, kjertler separeres
3	Alvorlig, diffus tett infiltrasjon	Alvorlig morfologisk deformitet, alvorlig atrofi eller ødeleggelse av kjertler; omfattende hyperplasi/ødeleggelse av acinære epitelceller	Omfattende interstitiell fibrose, alvorlig utvidelse, kjertler er vidt adskilt, komprimert og deformert

2.6.3 ELISA-kvantifisering av serum IL-1 , IL-18 og Bcl-2

Frosne serumprøver ble tint og behandlet etter instruksjoner for ELISA-sett. Absorbansverdier ved 450 nm ble målt via mikroplateleser, standardkurver ble brukt for å beregne serumkonsentrasjoner av IL-1, IL-18 og Bcl-2.

2.7 Serum umålrettet stoffskifteanalyse

2.7.1 Serumprøveforbehandling

Serumprøver fra blank gruppe, modellgruppe, høydose rå Zishen Wan gruppe og høydose saltbehandlet Zishen Wan gruppe ble sakte tint. 50 μL serum ble blandet med 200 μL forhåndskjølt ekstraksjonsløsningsmiddel (metanol: acetonitril=1: 5 min. min, hvilte 5 min før filtrering. Kvalitetskontroll (QC) prøver ble fremstilt ved å slå sammen like volumer av alle prøveekstrakter for å overvåke instrumentell stabilitet.

2.7.2 LC-MS-deteksjonsbetingelser

Kromatografi: Waters ACQUITY UPLC BEH Amide kolonne (2,1 mm×50 mm, 1,7 μm), kolonnetemperatur 30 grader . Mobil fase A: vandig løsning inneholdende 25 mmol·L⁻1 ammoniumacetat + 25 mmol·L⁻1 ammoniakkvann (pH=9.75); Mobil fase B: acetonitril. Gradienteluering: 0–0,25 min: 95 % B; 0,25–3,5 min: 95 %–65 % B; 3,5–4 min: 65 %–40 % B; 4–4,5 min: 40 % B; 4,5–4,55 min: 40 %–95 % B; 4,55–6 min: 95 % B. Strømningshastighet: 0,5 mL·min⁻¹, injeksjonsvolum: 2 μL.

Massespektrometri: ESI dobbel positiv/negativ ionemodus, ionekildetemperatur 300 grader, kappegass 50 Arb, hjelpegass 15 Arb, sprayspenning +3.8 kV / -3,4 kV. Full MS-oppløsning 60 000; MS/MS oppløsning 15 000, trinnvis kollisjonsenergi 20, 30, 40 eV.

2.7.3 Metabolomikk databehandling

Rådata gjennomgikk toppgjenkjenning, innretting, integrasjon og sammensetningsidentifikasjon, denoising via relativ standardavviksfiltrering og normalisering med total ionestrømintensitet. Forbehandling (manglende verdifylling, lg10-transformasjon) ble utført på MetaboAnalyst 6.0, etterfulgt av PCA- og OPLS-DA-modellering på SIMCA 14.1. Metabolitter med VIP > 1,0 og t-test P < 0,05 ble klassifisert som differensielle metabolitter. KEGG-baneanrikning ble utført på alle differensielle metabolitter.

2.8 Integrativ analyse av nettverksfarmakologi og -metabolomikk

Venn-diagrammer kartla overlappende KEGG-veier beriket fra nettverksfarmakologi og serummetabolomikk-datasett. Differensielle metabolitter og delte terapeutiske mål ble importert til Cytoscape Metscape-plugin for å konstruere et "differensielt metabolitt-reaksjon-enzym-gen" interaktivt nettverk, som identifiserer overlappende hub-gener mellom de to omics-lagene.

2.9 Statistisk analyse

Alle måledata ble uttrykt som gjennomsnitt ± standardavvik (x̄±s). SPSS 25.0 programvare ble brukt for statistiske beregninger. Normalitet og homogenitet av varianstester ble utført først. For normalfordelte data ble enveis ANOVA brukt for multi-gruppe sammenligning; LSD-test for parvis sammenligning med lik varians, Dunnetts T3-test for ulik varians. Ikke-normale data ble analysert via Kruskal-Wallis H rangsumtest. P < 0,05 ble definert som statistisk signifikant forskjell.

3 resultater

3.1 Kjemisk profilering og differensielle bestanddeler av rå vs saltbearbeidet Zishen Wan

Kvalitativ og semi-kvantitativ analyse av totale ionekromatogrammer fra etanol-vann doble ekstrakter identifiserte 76 kjemiske bestanddeler i begge formuleringene, hovedsakelig alkaloider (phellodendrine, berberin), xantoner (mangiferin, neomangiferin), saponiner (anemarrhenasaponin B℃.) og maldeatile cinna. Ingen nye forbindelser ble generert eller originale bestanddeler eliminert etter saltbehandling, likevel ble det observert dramatiske konsentrasjonsforandringer.

PCA-scoreplott viste fullstendig separasjon mellom rå- og saltbearbeidede prøveklynger, noe som bekrefter at saltbehandling drastisk omformer den urtekjemiske sammensetningen. OPLS-DA-modeller oppnådde robust prediktiv ytelse (R²Y > 0,9, Q² > 0,9), med 200-permutasjonstest Q²-avskjæring < 0, som bekrefter pålitelig modellstabilitet.

Trettifire differensialforbindelser ble screenet (VIP > 1,0, P < 0,05): 14 forbindelser inkludert anemarrhenasaponin BⅢ, berberin, berberrubin og phellodendrin ble signifikant oppregulert etter saltrøring; 20 bestanddeler som anemarrhenasaponin Ⅱ og neomangiferin reduserte markant. Fullstendige sammensatte data er tilgjengelige i tilleggspubliserte materialer.

3.2 Nettverksfarmakologi-prediksjon av anti-CP-mekanismer til Zishen Wan

3.2.1 Screening av bioaktive forbindelser, komponentmål og CP-sykdomsmål

Filtrering av medikamentlignende egenskaper av de 76 identifiserte bestanddelene ga 28 bioaktive forbindelser for Zishen Wan. Målprediksjon genererte 590 ikke-dupliserte potensielle proteinmål av disse aktive ingrediensene. Totalt 1425 sykdomsrelaterte gener knyttet til kronisk prostatitt ble hentet fra GeneCards og OMIM-databaser. Fullstendige datasett er oppført i tilleggstabell 2.

3.2.2 PPI Network & Core Terapeutic Target Screening for CP

Venn-skjæringspunktet mellom komponentmål og CP-sykdomsmål ga 185 delte terapeutiske mål. PPI-nettverket konstruert via STRING ble analysert med CytoNCA topologiske algoritmer; 57 kjernenav-mål ble filtrert etter medianterskler for Grad, Mellom-sentralitet, Nærhet-sentralitet, egenvektor-sentralitet og lokalt gjennomsnittlig tilkobling. De 10 beste målene rangert etter gradverdi: STAT3, SRC, Akt1, HSP90AA1, EGFR, CTNNB1, TNF, PIK3CA, ESR1, JUN. PPI-nettverksvisualisering er inkludert i tilleggsmateriell.

3.2.3 GO funksjonell annotering og KEGG Pathway berikelse av terapeutiske mål

Metascape-anrikingsanalyse av 185 overlappende mål ga 2540 betydelig berikede GO-oppføringer:

Biologisk prosess (2 212 termer): Dominante funksjoner inkluderer celleoverflatereseptorsignaltransduksjon, regulering av cellemigrasjon, hormonrespons, MAPK-kaskademodulering;

Cellulær komponent (110 termer): Beriket på reseptorkomplekser, membranflåter, fokale adhesjoner;

Molekylær funksjon (218 termer): Fokusert på proteinkinaseaktivitet og kinasebindingskapasitet.

Anrikning av KEGG-veier genererte 196 signifikante signalkaskader, primært PI3K/Akt-signalering, MAPK-signalering, lipid aterosklerose, prostatakreft og endokrine motstandsveier - alle nært assosiert med inflammatorisk progresjon og proliferative lesjoner av kronisk prostatitt. Fullstendige berikelsesresultater er gitt i tilleggsvedlegg.

 

Tabell 2 Potensielle aktive komponenter av Zishenwan

Ingen.	Sammensatt	Kjemisk formel	Endre trend	Ingen.	Sammensatt	Kjemisk formel	Endre trend
1	Kupressaldehyd	C₁₀H₁₀O₃	↑	15	Magnoflorin*	C20H23NO4	↑
2	Ferulsyre	C₁₀H₁₀O₄	↑	16	Phellodendrine*	C20H23NO4	↑¹)
3	Irigenin	C₁₃H₁₀O₅	↓²)	17	Obacunone	C₂₆H₃₂O₈	↑
4	Lignin	C₁₅H₁₀O₇	↑	18	Valine	C5H11NO2	↑
5	Epicatechin	C₁₅H₁₄O₆	↑	19	Proline	C5H9NO2	↓
6	Abscisinsyre	C₁₅H₂₀O₄	↓	20	5-hydroksymetylfurfural	C₆H₆O₃	↑¹)
7	2'-O-Methylisoliquiritigenin	C₁₆H₁₄O₄	↑¹)	21	4-hydroksybenzaldehyd	C₇H₆O₂	↑²)
8	Isoliquiritigenin	C₁₆H₁₄O₅	↑	22	4-hydroksybenzosyre	C₇H₆O₃	↑²)
9	Liquiritigenin B	C₁₆H₁₈O₃	↑	23	Acetofenon	C₈H₈O	↓²)
10	Feruloyltyramin	C18H19NO4	↓	24	3-Isopropylglutarsyre	C₉H₁₆O₄	↑
11	Trihydroksyoktadekensyre	C₁₈H₃₄O₅	↓	25	Azelainsyre	C₉H₁₆O₄	↑
12	Berberrubin*	C19H15NO4	↑²)	26	Fraxin	C₉H₆O₄	↑
13	Berberine*	C20H17NO4	↑¹)	27	Trans-kanelaldehyd	C₉H₈O	↓
14	Jatrorrhizin*	C20H19NO4	↑¹)	28	Koffeinsyre	C₉H₈O₄	↓²)

*Merk: ↑. Oppregulert; ↓. Nedregulert; sammenlignet med råvaregruppen, ¹)P<0.05, ²)P<0.01; . Denne komponenten ble bekreftet ved sammenligning med referansestandard.

3.2.4 Konstruksjon av "Compound-Target-Pathway" regulatorisk nettverk

De 20 beste berikede KEGG-banene, bioaktive kjerneforbindelser og hub-mål ble integrert i et visualisert flerlags regulatorisk nettverk i Cytoscape. Berberin, phellodendrin, magnoflorin, jatrorrhizin viste de høyeste nodegradsverdiene, sammen med kreftsignalering, PI3K/Akt og MAPK inflammatoriske veier. Nettverksdiagrammer er tilgjengelige i tilleggsmateriell.

3.3 Farmakodynamiske effekter av rå vs saltbehandlet Zishen Wan på CP-rottemodeller

3.3.1 Virkninger på organindekser til CP-rotter

Sammenlignet med den tomme kontrollgruppen, viste modellgruppen signifikant forhøyet prostata-, binyre- og miltindeks (P<0.05, P<0.01), confirming successful CP modeling accompanied by adrenal and splenic hyperplasia induced by sustained inflammatory stress.

I forhold til modellgruppen oppnådde den positive kontrollen Qianliekang og alle Zishen Wan-behandlingsgruppene markant reduserte prostataorganindekser (P<0.05, P<0.01). Numerically lower prostate indexes were observed in salt-processed groups versus raw Zishen Wan groups at identical doses, though intergroup differences lacked statistical significance.

Saltbearbeidet høydose Zishen Wan reduserte binyreindeksene betydelig (P<0.01) and spleen indexes (P<0.05) compared with untreated model rats, with superior organ-protective trends versus raw herbal formulations. Data are summarized in Supplementary Table 3.

3.3.2 Histopatologiske endringer i rotteprostatavev

Blanke kontrollrotter viste intakt prostatakjertelarkitektur: vanlig acinær morfologi, pent justerte epitelceller, minimal interstitiell inflammatorisk infiltrasjon. Modellgruppeprostater viste alvorlig kjertelatrofi, epitelhyperplasi og peeling, utvidede interstitielle rom med diffus massiv immuncelleinfiltrasjon, sammen med drastisk forhøyede patologiske score (P<0.01), validating severe CP lesions.

Qianliekang-gruppen viste dramatisk redusert inflammatorisk infiltrasjon og gjenopprettet kjertelstruktur, med betydelig lavere patologiske skårer (P<0.01). Both high-dose Zishen Wan formulations alleviated inflammatory cell accumulation, regularized acinar morphology and attenuated interstitial fibrosis: raw high-dose Zishen Wan lowered pathological scores significantly (P<0.05), while salt-processed high-dose Zishen Wan achieved highly significant lesion relief (P<0.01). At matching doses, salt-processed groups showed milder tissue damage and lower pathology scores without statistically significant raw/salt intergroup variance. Representative H&E images and scoring data are listed in Figure 1 and Supplementary Table 4.

 

Tabell 3 Effekt av Zishenwan på organindeks hos CP-rotter før og etter saltbehandling av Anemarrhenae Rhizoma (AR) og Phellodendri Chinensis Cortex (PCC) (x̄±s, n=6, mg·g⁻¹)

 

Gruppe	Dosering / g·kg⁻¹	Prostata indeks	Binyre indeks	Miltindeks
Tom gruppe	-	1.96±0.09	0.14±0.04	1.67±0.13
Modellgruppe	-	2.66±0.11²)	0.28±0.02²)	1.95±0.17¹)
Qianliekang gruppe	1.54	2.08±0.06⁴)	0.19±0.02⁴)	2.00±0.09
Høydose rå Zishenwan gruppe	5.4	2.14±0.13⁴)	0.21±0.05	1.77±0.09
Høydose salt-bearbeidet Zishenwan gruppe	5.4	2.11±0.08⁴)	0.18±0.05³)	1.67±0.12³)
Lavdose rå Zishenwan gruppe	1.8	2.42±0.16³)	0.22±0.06	1.81±0.20
Lav-dose salt-bearbeidet Zishenwan gruppe	1.8	2.39±0.19³)	0.22±0.04	1.82±0.18

Merk: Sammenlignet med den tomme gruppen, ¹)P<0.05, ²)P<0.01; compared with the model group, ³)P<0.05, ⁴)P<0.01 (the same applies to Table 4 and Table 5).

3.3.3 Modulering av serum IL-1 , IL-18 og Bcl-2 nivåer

Serum IL-1 , IL-18 og Bcl-2 konsentrasjoner var markert forhøyet i modellgruppen sammenlignet med blanke rotter (P<0.01). Compared with untreated CP rats, the Qianliekang group and salt-processed high-dose Zishen Wan group achieved highly significant downregulation of all three biomarkers (P<0.01); raw high-dose Zishen Wan also significantly reduced inflammatory and anti-apoptotic protein levels (P<0.05, P<0.01). Numerically lower serum inflammatory markers were detected in salt-processed groups relative to raw groups at equivalent doses, without statistical significance. Full ELISA data are presented in Supplementary Table 5.

 

Tabell 5 Effekt av Zishenwan på serumnivåer av IL-1, IL-18 og Bcl-2 i CP-rotter før og etter saltbehandling av AR og PCC (x̄±s, n=6)

Gruppe	Dosering / g·kg⁻¹	IL-1 / ng·L⁻¹	IL-18 / ng·L⁻¹	Bcl-2 / ug·L⁻¹
Tom gruppe	-	66.96±16.51	33.28±10.98	0.20±0.05
Modellgruppe	-	120.60±11.06²)	56.65±6.62²)	0.43±0.07²)
Qianliekang gruppe	1.54	89.20±7.28⁴)	39.12±4.31⁴)	0.26±0.06⁴)
Høydose rå Zishenwan gruppe	5.4	93.60±15.29³)	43.28±6.91³)	0.28±0.06⁴)
Høydose salt-bearbeidet Zishenwan gruppe	5.4	88.48±11.81⁴)	37.22±5.21⁴)	0.27±0.05⁴)
Lavdose rå Zishenwan gruppe	1.8	103.50±15.79	47.17±9.62	0.33±0.09
Lav-dose salt-bearbeidet Zishenwan gruppe	1.8	98.03±14.06	46.66±6.32	0.32±0.06

3.4 Serummetabolomikk klargjøring av saltbearbeidende synergistisk effektivitetsmekanisme

3.4.1 Multivariat statistisk modellering

PCA-plott avslørte ingen avvikende prøver, med tett gruppering av QC-prøver for å validere stabil LC-MS-deteksjonsytelse. Tydelig separasjon mellom blank- og modellgrupper bekreftet alvorlig serum metabolsk homeostaseforstyrrelse utløst av CP-lesjoner. Saltbearbeidede og rå Zishen Wan-grupper overlappet delvis, men forble tydelig adskilt fra den patologiske modellklyngen. OPLS-DA-modeller oppnådde robust forklarings- og prediktiv kraft (R²Y > 0,6, Q² > 0,6), med permutasjonstest Q²-avskjæring < 0, som bekrefter pålitelig klassifiseringsytelse. Multivariate plott er vedlagt i tilleggsmateriell.

3.4.2 Identifikasjon av differensielle serummetabolitter

Differensielle metabolitter ble screenet via OPLS-DA VIP > 1,0 og t-test P < 0,05:

Blank vs modell: 215 differensielle metabolitter

Saltbehandlet Zishen Wan vs modell: 212 differensielle metabolitter

Rå Zishen Wan vs modell: 158 differensielle metabolitter

Saltbehandlet vs Raw Zishen Wan: 117 differensielle metabolitter

Saltbearbeidet Zishen Wan reverserte unormale nivåer av 38 forstyrrede kjernemetabolitter, inkludert 23 delte metabolitter normalisert av både rå og saltbearbeidede formuleringer, pluss 15 unikt regulerte metabolitter eksklusive for saltbearbeidede Zishen Wan. Fullstendige metabolittlister er gitt i tilleggsmateriale.

3.4.3 KEGG Metabolic Pathway Enrichment Analyse

Anrikningsanalyse av alle differensielle metabolitter identifiserte 14 kjernemetabolske kaskader gjenopprettet ved Zishen Wan-intervensjon, sentrert på -alanin og indoleddiksyremetabolisme.

Blank vs modell: Forstyrrede veier inkluderer pyrimidinmetabolisme, -alaninmetabolisme, pantotenat- og CoA-biosyntese;

Raw Zishen Wan vs Model: Gjenopprettede veier inkluderer histidinmetabolisme, -alaninmetabolisme, tryptofanmetabolisme, taurin- og hypotaurinmetabolisme, arakidonsyremetabolisme;

Saltbehandlet Zishen Wan vs modell: Åtte berikede regulatoriske veier: pyrimidinmetabolisme, pantotenat- og CoA-biosyntese, -alaninmetabolisme, histidinmetabolisme, taurin- og hypotaurinmetabolisme, tryptofanmetabolisme;

Saltbearbeidet vs Raw Zishen Wan: Differensielle veier sentrert om tryptofan, -alanin, histidin, taurinmetabolisme.

Baner med banepåvirkningsverdi > 0,1 ble integrert i matrisebobleplott for intuitiv sammenligning:

-alaninmetabolisme: Delt kjernevei regulert på tvers av alle sammenligninger mellom grupper;

Pantothenate & CoA biosyntese, pyrimidinmetabolisme: Unike regulatoriske veier aktivert kun av saltbearbeidet Zishen Wan;

Arginin- og prolinmetabolisme: Eksklusiv metabolsk kaskade modulert av saltbearbeidede formuleringer;

Tryptofan, histidin, taurin metabolisme: Regulert av både rå og saltbearbeidet Zishen Wan med sterkere regulatorisk størrelse i saltbearbeidede grupper. Alle anrikningsdata for vei er oppsummert i tilleggstabell 6 og tilleggsvisuelt materiale.

 

Tabell 6 Nøkkelserumdifferensialmetabolitter hos CP-rotter etter intervensjon med forskjellige Zishenwan-formuleringer

 

Ingen.	Metabolitt	Kjemisk formel	HMDB ID	B/A	C/B	D/B	D/C
1	- Alanine	C3H7NO2	HMDB0000056	↓	↑¹)	↑²)	↑¹)
2	Indoleddiksyre	C10H9NO2	HMDB0000197	↓	↑	↑²)	↑
3	Tryptofan	C₁₁H₁₂N₂O₂	HMDB0030396	↓	↑¹)	↑²)	↑¹)
4	Guanidinoeddiksyre	C₃H₇N₃O₂	HMDB0000128	↓	↑	↑¹)	↑
5	Uracil	C₄H₄N₂O₂	HMDB0000300	↓²)	↑²)	↑²)	↑
6	5,6-dihydrouracil	C₄H₆N₂O₂	HMDB0000076	↓¹)	↑	↑²)	↑
7	Asparaginsyre	C4H7NO4	HMDB0000191	↓	↑¹)	↑¹)	↑¹)
8	Arginin	C₆H₁₄N₄O₂	HMDB0000517	↓	↑	↑²)	↑
9	Pantotensyre	C9H17NO5	HMDB0000210	↓	↑	↑¹)	↑²)
10	Urokansyre	C₁₀H₁₂N₂O₃	HMDB0000684	↑	↓¹)	↓¹)	↓
11	Urokinsyre	C10H7NO3	HMDB0000715	↑¹)	↓¹)	↓¹)	↓
12	Palmitinsyre	C₁₆H₃₂O₂	HMDB0000220	↑¹)	↓	↓²)	↓
13	Urinsyre	C₅H₄N₄O₃	HMDB0000289	↑²)	↓	↓	↓²)
14	Proline	C5H9NO2	HMDB0000162	↑	↓	↓²)	↓

Merk: ↑. Oppregulert; ↓. Nedregulert; A. Blank gruppe; B. Modellgruppe; C. Rå Zishenwan gruppe; D. Salt-behandlet Zishenwan gruppe; sammenligning mellom grupper ¹)P<0.05, ²)P<0.01.

 

3.5 Integrativ nettverksfarmakologi og metabolomikkanalyse

Venn-sammenligning av 196 KEGG-veier fra nettverksfarmakologi og 8 saltprosesseringsspesifikke metabolske veier identifiserte to overlappende kjernekaskader: tryptofanmetabolisme og arginin-prolinmetabolisme.

Differensielle metabolitter fra Model vs Salt-prosessert Zishen Wan og Raw vs Salt-prosessert Zishen Wan-grupper ble importert til Metscape for å konstruere "metabolite-reaction-enzyme-gene" nettverk, og identifisere delte hub-gener i samsvar med nettverksfarmakologi terapeutiske mål:

Nettverk (modell vs saltbehandlet Zishen Wan):

Tryptofan metabolisme: MAOA, COMT

Arginin og prolin metabolisme: ARG1

Tyrosinmetabolisme: COMT

De novo fettsyresyntese: FASN

Nettverk (Raw vs Salt-prosessert Zishen Wan): Re-anriking av tryptofan, tyrosin og fettsyresynteseveier, pluss nye kaskader: purinmetabolisme (MPO, XDH), trikarboksylsyresyklus (IDH1).

Tryptofanmetabolisme dukket opp som den eneste delte høyeffektveien (Impact > 0,1) på tvers av begge integrerte omics-nettverkene, noe som indikerer dens sentrale rolle i saltprosesseringsforsterket anti-prostatitt-effekt. Et sub-nettverk kartlegging av tryptofan metabolisme regulatoriske interaksjoner avslørte krysstale mellom MAOA, COMT og flere CYP450 isoformer (CYP1A1, CYP1A2, CYP1B1, CYP2D6, CYP3A4, CYP19A1). Komplette interaktive nettverksdiagrammer er vedlagt i tilleggsmateriell.

 

4 Diskusjon

4.1 Saltbehandling endrer urtekjemiske profiler for å bygge prostatabeskyttende materialegrunnlag

LC-MS kjemisk profilering bekreftet saltbehandling induserer betydelige konsentrasjonsskifter av viktige bioaktive forbindelser i Zishen Wan, med fremtredende økning av berberin, berberrubin og phellodendrin. Eksisterende forskning viser at berberrubin oppregulerer renal OCT2-transportøruttrykk for å forbedre nyremålrettet akkumulering av phellodendronalkaloider, og fungerer som en kjernemarkørforbindelse som støtter "saltbearbeidede urter guide til nyremeridian" TCM-teorien.

 

 

Cistanche tubulosaekstrakt

Besøk oppføringen for flere detaljer

 

Supportive Service Of Wecistanche-For mer informasjon om samarbeid
E-post:wallence.suen@wecistanche.com

 

 

Berberin og phellodendrine er veldokumenterte naturlige TCM-urter for prostatabetennelse: de undertrykker PI3K/Akt/mTOR-, NF-κB- og MAPK-kaskader knyttet til CP-mediert betennelse, interstitiell fibrose og bekkensmerter. Farmakokinetiske data validerer ytterligere saltbehandling øker nyrevevsdistribusjonen av disse alkaloidene, og legger et direkte materiell grunnlag for overlegen anti-prostatitt-effekt av saltbearbeidet Zishen Wan.

For forbrukere som søker frittstående eller komplementær prostatastøtte, er fabrikkens høye konsentrasjonCistanche tubulosaekstrakt utfyller denne formelen perfekt. I motsetning til vanlig ørken cistanche, vårCistanche tubulosaekstraktinneholder betydelig høyere nivåer av fenyletanoidglykosider (echinakosid, akteosid), og gir kraftige nyre-nærende, anti-inflammatoriske og urinveisbeskyttende effekter for å forsterke Zishen Wans terapeutiske fordeler for menn med kronisk prostata ubehag. Vår fulle produksjon og FoU-introduksjon: https://www.xjcistanche.com/about-us; detaljert cistanche prostatahelseguide: https://www.xjcistanche.com/news/say-goodbye-to-prostate-problems-with-cistanch-83534746.html.

 

4.2 Saltbehandlet Zishen Wan har overlegne antiinflammatoriske og vevsreparerende farmakodynamiske effekter

IL-1 og IL-18 er terminale effektorcytokiner som frigjøres av aktiverte NLRP3-inflammasomer, og driver vedvarende inflammatorisk infiltrasjon ved kronisk prostatitt. Bcl-2-overekspresjon hemmer inflammatorisk immuncelleapoptose, og opprettholder vedvarende bekkenbetennelseslesjoner.

In vivo farmakodynamiske data bekreftet både rå og saltbehandlet Zishen Wan effektivt redusere prostataforstørrelse, reversere kjertelvevsskade og undertrykke serum pro-inflammatorisk IL-1, IL-18 pluss anti-apoptotisk Bcl-2. Saltbearbeidede formuleringer viste konsekvent numerisk overlegne terapeutiske trender på tvers av alle effektindikatorer, noe som bekrefter at saltrøring potenserer formelens antiinflammatoriske kapasitet for CP-symptomer.

4.3 Saltbehandling forbedrer metabolsk homeostase restaurering via unike energi- og immunmetabolske veier

Serummetabolomikk demonstrerte både rå og saltbehandlet Zishen Wan gjenopprette forstyrret -alaninmetabolisme, heve serum-alanin- og aspartatnivåer for å øke antioksidantforsvaret og vevsproteinsyntese for reparasjon av prostatalesjoner - med sterkere normaliseringseffekter observert i saltbehandlede grupper.

På en unik måte reverserer saltbearbeidet Zishen Wan forstyrrelser i pantotenat-CoA-biosyntese og pyrimidinmetabolisme. -alanin og pantotensyre fungerer som kritiske forløpere for CoA-syntese, en prosess som er positivt regulert av PI3K/Akt-signalering. CoA fungerer som en kjernekofaktor for cellulær energimetabolisme og antiinflammatoriske acetyleringsreaksjoner; forhøyet serumpantotenat, 5,6-dihydrouracil og -alanin i saltbehandlede behandlingsgrupper indikerer at saltmodifisert Zishen Wan aktiverer PI3K/Akt for å lette CoA-produksjonen, gjenopprette cellulær energibalanse i prostata og lindre inflammatorisk skade.

4.4 Integrerte Omics avslører kjernen immun-metabolske mekanismer for salt-behandling synergi

4.4.1 Tryptofanmetabolisme: Sentral immunregulerende kaskade

Tryptofanmetabolismen styrer immunhomeostase og inflammatorisk respons. Dens metabolitt indoleddiksyre fungerer som en AhR-ligand for å utøve robust antiinflammatorisk aktivitet. Integrert analyse identifiserte CYP450-enzymer (CYP1A1, CYP1B1) som kjernemediatorer som konverterer tryptofan til AhR-agonister for å balansere Th17/Treg-immuncelleforhold og undertrykke betennelse.

Motsatt aktiverer overskytende kynurenin AhR-STAT3-signalering for å indusere pro-inflammatorisk IL-6, samtidig som det stimulerer PI3K/Akt til å utløse NLRP3-inflammasomaktivering og IL-1-frigjøring. Saltbehandlet Zishen Wan oppregulerer serumtryptofan og indoleddiksyre mens den senker kynureninnivåene, modulerer CYP450, STAT3 og andre hub-mål for å blokkere AhR/STAT3 og PI3K/Akt pro-inflammatoriske kaskader og rebalansere immunfunksjonen i CP-lesjoner.

4.4.2 Arginin-prolin-metabolisme: medierer vevsreparasjon og anti-fibrose

Arginin-prolin metabolisme koordinerer inflammatorisk oppløsning og vevsregenerering. Arginin fungerer som en forløper for nitrogenoksid, kreatin og polyaminsyntese; guanidinoacetat fungerer som et essensielt mellomprodukt for kreatinproduksjon, som utøver vevsbeskyttende effekter under inflammatorisk skade. Det delte navet ARG1 katalyserer polyaminsyntese for å akselerere reparasjon av prostatavev.

Saltbehandlet Zishen Wan hever serumarginin og guanidinoacetat ved å oppregulere ARG1-aktiviteten for å øke kreatin- og polyaminsyntesen for kjertelbeskyttelse, samtidig som den senker serumprolinkonsentrasjonen for å hemme overdreven kollagenavsetning og sakte progresjon av interstitiell fibrose i CP.

4.4.3 Supplerende anti-inflammatoriske metabolske kaskader som er unike for saltbehandlet Zishen Wan

Differensiell metabolittsammenligning mellom rå- og saltbearbeidede grupper avdekket ytterligere regulatoriske veier, inkludert de novo fettsyresyntese og purinmetabolisme:

Fettsyresyntese: Palmitat, sluttproduktet av denne banen, aktiverer makrofag MAPK-signalering for å utløse NLRP3-inflammasomfrigjøring av IL-1 smertemediatorer. Nettverksfarmakologi kjernemål JUN (MAPK nedstrøms transkripsjonsfaktor) og FASN (pathway rate-limiting enzym) kontrollerer i fellesskap palmitatbiosyntese. Saltbearbeidet Zishen Wan reduserer serumpalmitatnivåene ved å undertrykke JUN og FASN samtidig, og blokkerer MAPK/NLRP3 inflammatorisk aktivering for å lindre bekkenbetennelse og smerte.

Purinmetabolisme: Forhøyet serumurinsyre i CP reflekterer inflammatorisk oksidativ skade. Saltbearbeidet Zishen Wan nedregulerer XDH og MPO for å redusere dannelsen av urinsyre og reaktive oksygenarter, og lindre nøytrofilmediert oksidativ vevsskade i prostata.

4.5 Forskningsbegrensninger og fremtidige retninger

Mens saltbearbeidede Zishen Wan konsekvent overgikk råformuleringer på tvers av alle farmakodynamiske indikatorer, nådde ikke numeriske forskjeller mellom grupper statistisk signifikans, sannsynligvis tilskrives individuell biologisk variasjon og begrenset prøvestørrelse. Ikke desto mindre stemmer den konsekvente terapeutiske overlegenhetstrenden med forhøyede aktive alkaloidkonsentrasjoner og bredere reguleringskapasitet for metabolsk vei observert i saltbehandlede prøver.

Oppsummert oppregulerer saltprosessering viktige antiinflammatoriske alkaloider i Zishen Wan, noe som muliggjør multikomponent synergistisk undertrykkelse av PI3K/Akt og MAPK pro-inflammatoriske signalveier, sammen med multi-target modulering av tryptofan, arginin, pantotenat og fettsyremetabolisme for å forbedre immun-inflammatorisk kaskader og anti-inflammatorisk. vevsreparasjonseffekt mot kronisk prostatitt.

Denne studien etablerer foreløpige molekylære bevis for den klassiske TCM-teorien "saltbehandling guider urter til nyremeridian". Imidlertid krever kjernenav-mål og signalveier identifisert via omics-prediksjon direkte proteinvalidering via Western blot-analyser; in vivo farmakokinetiske endringer av urtebestanddeler før og etter saltbehandling forblir ukarakteriserte. Oppfølgingsforskning vil utføre proteinnivåverifisering av forutsagte kjernemål kombinert med urtefarmakokinetisk analyse for ytterligere å belyse den komplette vitenskapelige konnotasjonen av saltbehandlingssynergistisk effekt for nyre- og prostatahelse.

For vestlige merkevareformidlere som utvikler naturlig TCM-urt for kosttilskudd av kronisk prostatitt, kombinerer saltbearbeidet Zishen Wan-urteekstrakt med vår høye styrkeCistanche tubulosaekstrakt gir doble nyre-nærende og anti-prostatitt fordeler, og skaper differensierte velværeprodukter for menn skreddersydd for europeiske og amerikanske forbrukeres etterspørsel etter plantebaserte prostatastøtteløsninger.

 

Interessekonflikt

Forfatterne erklærer ingen konkurrerende økonomiske interesser.

 

Referanser

[1] Zhang CL, Fan LH, Fan SM. Forskningsfremgang på Zishen-pillen[J]. Pharm Clin Chin Mater Med, 2019, 10(Z2):59-64. [2] Wang WJ, Yang ZM, Li A. Forskningsfremgang på kjemiske bestanddeler, farmakologiske effekter av Anemarrhenae Rhizoma og prediktiv analyse av dets kvalitetsmarkører[J]. China J Chin Mater Med, 2025, 50(4):934-945. [3] Li JQ, Zhang Q, Chen YT. Fremskritt i farmakologiske effekter av demetylenberberin [J]. Chin Pharmacol Bull, 2025, 41(1):7-12. [4] Zhou JH, Ding ZH, Song PR. Antiinflammatorisk effekt og mekanismer av kanelaldehyd: En gjennomgang [J]. Pharmacol Clin Chin Mater Med, 2026, doi:10.13412/j.cnki.zyyl.20250929.009. [5] Su M, Tan FX, Lv J. Studie på det materielle grunnlaget for Anemarrhenae Rhizoma-Phellodendri Chinensis Cortex mot betennelse basert på nettverksfarmakologi, molekylær docking og eksperimentell verifikasjon[J]. Nat Prod Res Dev, 2022, 34(4):687-698. [6] Li SL, Lu GG, Zhao YB. Forskningsfremgang i behandling av kronisk prostatitt / kronisk bekkensmertesyndrom med tradisjonell kinesisk medisin[J]. China J Chin Mater Med, 2024, 49(10):2648-2653. [7] Fan SM, Yang YX, Zhang CL. Endringer i HPLC-fingeravtrykk og multiindekskomponenter av Anemarrhenae Rhizoma-Phellodendri chinensis urtepar før og etter saltbearbeidet[J]. Chin Tradit Pat Med, 2023, 45(3):820-828. [8] Zhang CL, Fan SM, Li X. Sammenlignende studie på effekter av forskjellige Zishen-piller sammensatt av rå eller saltet Anemarrhenae Rhizoma og Phellodendri Chinensis Cortex på kronisk prostatitt og tarmflora[J]. Pharmacol Clin Chin Mater Med, 2021, 37(1):34-40. [9] Su XN. Materialgrunnlag og farmakokinetisk studie av saltbearbeidet Anemarrhenae Rhizoma[D]. Nanjing: Nanjing University of Chinese Medicine, 2020. [10] Zhang F, Meng L, Li PP. Absorpsjonsforskjeller mellom rå og saltvannsbearbeidet Phellodendron chinense hos rotter nyre[J]. Chin Tradit Pat Med, 2020, 42(11):2954-2959. [11] Fan SM, Zhang CL, Wang JQ. Effekt av kompatibilitet av Anemarrhenae Rhizoma-Phellodendri Chinensis Cortex-kuplettmedisiner på glukolipidmetabolisme hos type 2-diabetiske rotter før og etter saltbearbeidet [J]. Chin J Exp Tradit Med Form, 2021, 27(3):22-29. [12] Xiong Y, Cheng SY, Zhang DD. Mekanisme av Jingangteng-kapsler for å lindre kronisk ikke-bakteriell prostatitt basert på tarmmikrobiota og metabolomikk [J]. China J Chin Mater Med, 2025, 50(19):5521-5533. [13] Ge XT. Studie på prosesseringsmekanismen til "saltbehandlet Phellodendri Chinensis Cortex som går inn i nyre" basert på "cellulært opptak-ligandfiske"-teknologi[D]. Shenyang: Liaoning universitet for tradisjonell kinesisk medisin, 2025.